双缩脲法测定蛋白质的浓度课件.pptx

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尿素被加热,则两分子尿素放出一分子氨而形成双缩脲。双缩脲在碱性环境中,能与硫酸铜结合成紫色化合物,此反应称为双缩脲反应。;蛋白质分子中含有肽键与缩脲结构相同,故也能进行此反应。双缩脲反应可作为蛋白质定量测定依据。

;;三、试验试剂

1、2mg/ml牛血清白蛋白液:将1g牛血清白蛋白溶于0.9%NaCl溶液并稀释至1000ml.

2、双缩脲试剂:将1.75gCuSO4.5H2O溶于约150ml蒸馏水,然后置于1000ml容量瓶中,加入300ml浓氨水、300ml冰凉蒸馏水和200ml饱和氢氧化钠溶液,摇匀,室温放置2小时,再加蒸馏水至刻度,摇匀备用。

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