2实验室检验技术(1).ppt

②漂浮法适于检查线虫卵、绦虫卵和球虫卵囊。取粪便10g，加饱和食盐水100ml，混合，通过60目筛滤入烧杯中，静置0.5h，则虫卵上浮；用直径5-10mm的铁丝圈，与液面平行接触以蘸取表面液膜，抖落于载玻片上检查。取粪便1g，加饱和食盐水10ml，混匀，筛滤，滤液注入试管中，补加饱和盐水溶液使试管充满，上覆以盖玻片，并使液体与盖玻片接触，其间不留气泡，直立0.5h后，取下盖玻片，覆于载玻片上检查。在检查比重较大的猪后圆线虫卵时，则可先将猪粪按沉淀法操作，取得沉渣后，在沉渣中加入饱和硫酸镁溶液进行漂浮，收集虫卵(图2-9)。2、虫卵计数法虫卵计数法是测定每克动物粪便中的虫卵数，推断动物体内某种寄生虫的寄生数量，用于使用驱虫药前后虫卵数量的对比，以检查驱虫效果。虫卵计数结果，常以每克粪便中卵数表示，简称e·p·g。⑴斯陶尔氏法在一小玻璃容器(如三角烧瓶或大试管)的56ml和60ml容量处各做一个标记；先取0.4％的氢氧化钠溶液注入容器内到56ml处，而后再加入被检粪便溶液升到60ml处，加入一些玻璃珠，振荡使粪便完全破碎混匀；用1ml吸管取粪液0.15ml，滴于2-3张载玻片上，覆以盖玻片，在显微镜下顺序检查，统计虫卵总数时注意不可遗漏和重复。因0.15ml粪液中实际含有粪量是0.15×4／60＝0.01g。因此，所得虫卵总数乘100即为每克粪便中的虫卵数。此法适用于大部分蠕虫卵的计数。⑵麦克马斯特氏法将虫卵浮集于一个计数室中记数。计数室是由二片载玻片制成。为了使用方便，制作时常将其一片切去一条，使之较另一片窄一些。在较窄的玻片上刻以1cm见方的区域2个，尔后选取厚度1.5mm的玻片切成小条垫于两玻片间，以环氧树脂粘合。取粪便2g于乳钵中，加水10ml搅匀，再加饱和盐水50ml。混匀后，吸取粪液注入计数室，置显微镜台上静置1-2min后，在显微镜下计数1cm2刻度中的虫卵总数，求2个刻度室中虫卵数的平均数，乘以200即为每克粪便中的虫卵数。此法只适用于可被饱和盐水浮起的各种虫卵。⑶片形吸虫卵计数法取羊粪10g于300ml容量瓶中，加入少量1.6％氢氧化钠溶液，静置过夜。次日，将粪块搅碎，再加1.6％氢氧化钠溶液到300ml刻度处，摇匀，立即吸取此粪液7.5ml注入到离心管内，1000r／min离心2min，倾去上层液体，换加饱和盐水再次离心，再倾去上层液体，再换加饱和盐水，如此反复操作，直到上层液体完全清澈为止。倾去上层液体，将沉渣全部分滴于数张载玻片上，检查统计虫卵总数，以检查统计总数乘以4，即为每克粪便中的片形吸虫卵数。第三节粪便检查一、粪便的采集二、物理学检查三、化学检查四、粪便显微镜检查一、粪便的采集要采集新排出且未接触地面的部分，放入清洁的器皿。粪上附着的血块、脓汁及伪膜等，均应一一采集。二、物理学检查（一）硬度粪便稀软，见于消化不良、肠炎；粪便干燥，见于肠便秘。（二）颜色黑褐色粪便，见于消化道上部出血；粪便有血块、血丝，见于消化道下部出血，尤其多见于直肠出血；黄绿色粪便，见于钩端螺旋体病等引起的黄疸。（三）气味健康动物的粪便无难闻的臭味，当消化不良及胃肠炎时，由于肠内容物的腐败发酵，粪便有酸臭或腐败臭，出血时多有腥臭味。（四）异常混合物⒈黏液正常粪便表面有极薄的黏液层。黏液量增多表示肠管有炎症或排粪迟滞，肠炎或肠阻塞时黏液往往覆盖整个粪球，并可形成较厚的胶冻样黏液层，类似剥脱的肠黏膜。⒉伪膜随粪便排出的伪膜是由纤维蛋白、上皮细胞和白细胞所组成，常为圆柱状。见于纤维素性或伪膜性肠炎。⒊脓汁直肠内脓肿破溃时，粪便中混有脓汁。⒋粗纤维及饲料颗粒消化不良及牙齿疾病时，粪便内含有多量粗纤维及未消化饲料颗粒。⒌血液胃肠出血、出血性肠炎、出血性败血症、犬冠状病毒感染及犬细小病毒感染、球虫感染等，粪便中含有血液。⒍粪便中常见寄生虫有蛔虫、绦虫体节及犬猫的钩虫。三、化学检查酸碱度测定潜血试验蛋白质检查有机酸测定氨测定(一)酸碱度测定健康宠物的粪便呈碱性。酸度增加，见于肠卡他引起的肠内糖类异常发酵；碱性增加，见于胃肠炎引起的蛋白质腐败分解增加。⒈试纸法取粪2－3g于试管内，加中性蒸馏水8－10ml混匀，用广范围试纸测定其pH值。⒉试管法取粪2－3g于试管内，加中性蒸馏水4－5倍，混匀。置37℃温箱中6～8h，如上层液透明清亮，为酸性(粪中磷酸盐和碳酸盐在酸性