组培试验方案设计（园艺植物组织培养）.pptx

组培技术研发试验方案设计12CONTENTS试验方案设计组培信息搜索试验方案设计二、试验方案设计（一）组培快繁的程序（二）组培快繁类型与再生途径（三）组培技术路线（四）组培苗的遗传稳定性（五）组培试验设计方法（六）组培方案撰写格式二、试验方案设计什么是组培快速繁殖又称微体繁殖（微繁），是指利用组织培养技术进行的一种营养繁殖方法，繁殖速度快，数量大。二、试验方案设计（一）组培快繁的程序无菌材料的建立培养材料的增殖试管苗生根培养试管苗移栽驯化二、试验方案设计植物组织培养一般过程初代培养继代培养生根培养驯化移栽二、试验方案设计初代培养：芽、茎段、叶片、花器等外植体在离体培养条件下诱导愈伤组织、侧芽或不定芽、胚状体过程。二、试验方案设计继代培养：更换新鲜培养基来繁殖同种类型的材料（愈伤组织、芽）。马铃薯继代培养二、试验方案设计生根培养：将芽苗转接到生根培养基上培养成为完整植株的过程。二、试验方案设计驯化移栽：组培苗经人工炼苗后移栽到驯化苗床上使之适应露地或保护地条件的过程。软枣猕猴桃驯化苗二、试验方案设计（二）组培快繁类型与再生途径不同物种，不同外植体类型，培养基中激素种类不同，培养条件的差异，都会导致试管苗发生途径不同。1.嫩芽增殖途径2.丛生芽增殖途径3.器官发生途径4.胚状体途径5.原球茎途径二、试验方案设计1.嫩芽增殖途径新梢大量无菌苗生根培养茎段二、试验方案设计2.丛生芽增殖途径外植体脱分化愈伤组织再分化初代芽、芽丛切割芽丛继代培养继代生根培养试管苗大量芽丛二、试验方案设计3.器官发生途径二、试验方案设计4.胚状体发生途径胚状体试管苗胚状体试管苗外植体器官器官游离单细胞游离单细胞小孢子小孢子愈伤组织愈伤组织对应于种子胚而言。在离体培养过程中产生一种形似胚（具有明显的根端和芽端），功能与胚相同的结构。二、试验方案设计5.原球茎途径类胚组织，缩短的、呈珠粒状的、由性细胞组成的、类似嫩茎的器官。二、试验方案设计根、芽外植体试管苗愈伤组织芽、根根芽胚状体原球茎根、芽根、芽二、试验方案设计（三）组培技术路线内因影响组培的因素植物自身特点（1）外植体（类型、取材部位、采集时期）（2）培养基种类（3）激素（种类、浓度、配比）（4）添加物及糖（种类、浓度）（5）PH值（6）光照（光培养、暗培养、光周期、光质）（7）温度（高温、低温、恒温、变温）（8）培养方式（固体、液体、振荡、静置）外因二、试验方案设计外植体生长素和细胞分裂素培养基种类组培技术路线PH值和离子浓度温度与湿度光照培养方式二、试验方案设计（四）组培苗的遗传稳定性1.影响组培苗遗传稳定性的因素2.提高遗传稳定性的措施二、试验方案设计1.影响组培苗遗传稳定性的因素基因型继代次数和时间植株再生方式外源激素二、试验方案设计2.提高组培苗遗传稳定性的措施（1）采用生长点、腋芽生枝、胚状体繁殖方式，可有效减少变异；（2）缩短继代时间，限制继代次数，每隔一定继代次数后，重新进行初代培养；（3）采集幼龄的外植体材料；（4）采用适当的激素种类和较低的浓度；（5）培养基中减少或不使用容易引起诱变的化学物质；（6）定期检测，及时剔除生理、形态异常苗，并进行多年跟踪检测，调查再生植株开花结实特性，以确定其生物学性状和经济性状是否稳定。二、试验方案设计（五）组培试验设计方法一、单因子试验二、双因子试验（拉丁方设计）三、多因子试验（正交设计）二、试验方案设计2种激素5种浓度的试验组合Ⅰ6－BA（mg/L)NAA（mg/L)A1A2A3A4A5B1A1B1A2B1A3B1A4B1A5B1B2B2A1B2A2B2A3B2A4B2A5B3B3A1B3A2B3A3B3A4B3A5B4B4A1B4A2B4A3B4A4B4A5B5A1B5A2B5A3B5A4B5A5二、试验方案设计2种激素5种浓度的试验组合Ⅱ6－BA（mg/L)低中高NAA（mg/L)低低低中低高低中中低中中中高高高低高中高高二、试验方案设计正交表的代号正交试验试验因子数（列号数）L16(45)正交表试验因子的作用剂量水平数（可容纳的水平数）试验方案形成的处理数二、试验方案设计L4(23)正交表正交试验二、试验方案设计L4(23)正交试验设计正交试验水平