2024年度-公开课讲课用微生物的实验室培养.ppt

公开课讲课用微生物的实验室培养

目录

微生物实验室培养概述

微生物实验室培养基本操作

微生物生长曲线与测定方法

微生物代谢产物检测与分析

微生物实验室培养中常见问题及解决方法

微生物实验室安全规范与操作注意事项

01

微生物实验室培养概述

Chapter

01

研究微生物的生理生化特性

02

03

04

筛选和鉴定微生物种类

生产微生物制品，如酶、抗生素等

应用于环境、医学、工业等领域

在固体培养基上培养微生物，形成菌落，便于观察和计数。

固体培养

液体培养

特殊培养

在液体培养基中培养微生物，适用于大规模培养和工业生产。

针对某些特殊微生物或特殊需求而设计的培养方法，如厌氧培养、高压培养等。

03

02

01

提供无菌操作环境，避免杂菌污染。

观察微生物形态和结构，辅助鉴定和计数。

如移液器、离心机、分光光度计等，用于微生物培养的辅助操作和分析。

提供适宜的温度和湿度环境，促进微生物生长。

对培养基、器皿等进行灭菌处理，保证无菌操作。

无菌操作台

培养箱

显微镜

灭菌设备

其他辅助设备

02

微生物实验室培养基本操作

Chapter

根据目标微生物的营养需求和生长特性，选择适当的培养基成分，如碳源、氮源、矿物质、生长因子等。

选择合适的培养基

按照培养基配方准确称量各成分，加入适量蒸馏水或去离子水，充分搅拌溶解后，调节pH值至适宜范围。

配制培养基

将配制好的培养基分装到试管、培养皿等容器中，密封后进行高压蒸汽灭菌，以消除培养基中的杂菌。

培养基分装与灭菌

接种前准备

在无菌操作台上准备好已灭菌的培养基、接种环、酒精灯等接种工具，确保无菌操作环境。

接种操作

用接种环挑取少量待接种的微生物，在酒精灯火焰附近将接种环烧至红热，以杀死环上可能存在的杂菌。然后将接种环冷却后，轻轻刮取微生物样本，在培养基表面划线或涂布。

分离纯化

通过观察微生物在培养基上的生长情况，挑选单菌落进行分离纯化。可采用划线分离法、稀释涂布平板法等方法进行分离纯化。

温度控制

根据目标微生物的生长温度要求，设置培养箱或恒温摇床的温度，保持恒定的培养温度。

光照条件

某些微生物生长需要光照，可将培养皿放置在光照培养箱中，提供适宜的光照强度和光照时间。

氧气供应

对于好氧微生物，需保证充足的氧气供应，可通过摇床振荡或通入无菌空气等方式提供氧气。对于厌氧微生物，则需创造无氧环境，如使用厌氧培养箱或厌氧袋进行培养。

湿度控制

对于需要较高湿度的微生物，可通过在培养皿内放置湿滤纸片或使用加湿器等措施，提高培养环境的湿度。

03

微生物生长曲线与测定方法

Chapter

描述微生物在液体培养基中生长时，菌体数量随时间变化的曲线。

生长曲线的定义

通常包括延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段。

生长曲线的阶段划分

01

02

03

04

监测微生物生长状态

通过观察生长曲线可以判断微生物是否处于正常生长状态，以及不同生长阶段的特点。

控制发酵过程

在发酵工业中，通过监测和控制微生物生长曲线可以实现发酵过程的优化和控制，提高产品质量和产量。

优化培养条件

通过分析生长曲线可以确定微生物生长的最适温度、pH值、营养物质浓度等培养条件。

评估微生物活性

生长曲线还可以用于评估微生物的活性，如酶活性、代谢活性等，为相关研究和应用提供数据支持。

04

微生物代谢产物检测与分析

Chapter

微生物通过代谢活动产生的、自身生长和繁殖所必需的物质，如氨基酸、核苷酸、多糖、脂类等。这些物质对微生物的生长和生存具有重要意义。

微生物在一定生长时期，以初级代谢产物为前体，合成一些对微生物的生命活动无明确功能的物质，如抗生素、激素、生物碱、毒素等。这些物质通常具有种属特异性，并在微生物之间的竞争中发挥作用。

初级代谢产物

次级代谢产物

色谱法

01

利用不同物质在固定相和流动相之间的分配系数不同，使各组分分离后进行检测的方法。常用的色谱法包括薄层色谱法、纸色谱法、柱色谱法等。

质谱法

02

将样品分子转化为带电粒子，并利用它们的质量和电荷比进行分离和检测的方法。质谱法具有高灵敏度、高分辨率和高准确性的特点，适用于复杂样品中微量组分的定性和定量分析。

光谱法

03

利用物质与电磁辐射相互作用产生的发射、吸收或散射光谱进行分析的方法。常用的光谱法包括紫外-可见光谱法、红外光谱法、核磁共振光谱法等。

微生物鉴定

通过分析微生物代谢产物的种类和数量，可以对微生物进行种类鉴定和分类。这对于研究微生物的生态分布、生理特性和代谢途径具有重要意义。

发酵工程

在发酵工程中，通过优化微生物的培养条件和代谢途径，可以提高目标代谢产物的产量和质量。同时，对代谢产物的检测和分析也有助于监控发酵过程和评估产品质量。

生物制药

许多微生物代谢产物具有药用价值，如抗生素、抗肿瘤药物等。通过实验室培养微生物并提取其