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MicroRNA-34a在非酒精性脂肪性肝病中的作用及机制研究中期报告

本项目旨在研究microRNA-34a在非酒精性脂肪性肝病中的作用及机制。研究方法包括动物模型、细胞实验和分子生物学技术。研究内容如下：

一、实验设计

1.1动物模型

选取4周龄的健康C57BL/6J小鼠作为研究对象，随机分为对照组和实验组，每组10只。实验组小鼠通过高脂饮食诱导建立非酒精性脂肪性肝病模型。对照组小鼠饮食正常饲料。

1.2细胞实验

选取人类肝细胞株L02作为研究对象，分为对照组和实验组。实验组细胞通过高脂培养基和游离脂肪酸诱导建立非酒精性脂肪性肝病模型。对照组细胞培养在正常培养基下。

1.3实验组织采集

实验结束后，对各组小鼠肝脏组织进行采集，并进行组织学检测。

二、实验方法

2.1RNA抽提和检测

使用Trizol试剂提取小鼠肝组织和人类肝细胞的总RNA。使用NanoDropND-1000光度计测定RNA的纯度和浓度。使用qRT-PCR技术检测microRNA-34a的表达水平。

2.2组织学检测

对小鼠肝组织进行病理学检测，包括HE染色和油红O染色，评估肝脏组织病变的情况。

2.3细胞实验

使用高脂培养基和游离脂肪酸诱导L02细胞产生细胞脂肪变性，评估microRNA-34a在细胞脂肪变性中的作用。

三、预期结果

本研究将评估microRNA-34a在非酒精性脂肪性肝病中的作用及机制，预计将得到以下结果：

1.高脂饮食诱导的小鼠模型具有非酒精性脂肪性肝病的特点，包括肝脏脂肪变性和炎症反应。

2.microRNA-34a在非酒精性脂肪性肝病中的表达水平上调。

3.抑制microRNA-34a的表达将减轻小鼠模型中的肝脏脂肪变性和炎症反应。

4.microRNA-34a在人类肝细胞L02中的表达水平上调，与高脂培养基和游离脂肪酸诱导的细胞脂肪变性相关。

综上，本研究将为非酒精性脂肪性肝病的发病和治疗提供新的分子机制，并为开发新的治疗方法提供基础实验支持。