BMSCs联合促红细胞生成素治疗大鼠脊髓损伤的实验研究.pptxVIP

BMSCs联合促红细胞生成素治疗大鼠脊髓损伤的实验研究

汇报人：

2024-01-17

引言

材料与方法

实验结果

讨论

结论与展望

目录

01

引言

脊髓损伤的危害：脊髓损伤是一种严重的中枢神经系统损伤，常导致损伤平面以下肢体严重的功能障碍，给社会和家庭带来沉重负担。

当前治疗方法的局限性：目前脊髓损伤的治疗方法主要包括手术减压、药物治疗、康复训练等，但效果有限，无法完全恢复神经功能。

BMSCs联合促红细胞生成素治疗的意义：近年来，干细胞移植治疗脊髓损伤成为研究热点，其中骨髓间充质干细胞（BMSCs）因具有多向分化潜能和免疫调节功能而受到广泛关注。促红细胞生成素（EPO）是一种促进红细胞生成的激素，同时具有神经保护作用。本研究旨在探讨BMSCs联合EPO治疗脊髓损伤的效果及机制，为脊髓损伤的治疗提供新的思路和方法。

目前，国内外已有大量关于BMSCs和EPO在脊髓损伤中单独应用的研究，证实它们均能促进脊髓损伤后的神经功能恢复。然而，关于BMSCs联合EPO治疗脊髓损伤的研究相对较少，且其具体机制尚不明确。

国内外研究现状

随着干细胞技术和神经生物学的不断发展，BMSCs联合EPO治疗脊髓损伤的研究将不断深入。未来，研究方向将更加注重联合治疗的效果评估、安全性评价以及临床应用转化等方面。

发展趋势

本研究旨在探讨BMSCs联合EPO治疗脊髓损伤的效果及机制，为脊髓损伤的治疗提供新的思路和方法。

研究目的

首先，我们将从大鼠骨髓中分离培养BMSCs，并对其进行鉴定和扩增。接着，我们将构建大鼠脊髓损伤模型，并分别给予BMSCs移植、EPO注射以及BMSCs联合EPO治疗。通过比较各组大鼠的神经功能恢复情况、脊髓组织病理变化以及相关分子表达水平等指标，评估不同治疗方法的效果及机制。最后，我们将对实验结果进行统计学分析，得出科学可靠的结论。

研究内容

02

材料与方法

选用健康成年雄性SD大鼠，体重250-300g，由实验动物中心提供。

实验动物

将大鼠随机分为4组，每组10只，分别为对照组、脊髓损伤组、BMSCs治疗组和联合治疗组。

分组

取大鼠股骨和胫骨，用PBS冲洗骨髓腔，收集骨髓细胞悬液。

分离

培养

鉴定

将骨髓细胞悬液接种于培养瓶中，加入含10%胎牛血清的DMEM培养基，置于37℃、5%CO2培养箱中培养。

通过流式细胞术鉴定BMSCs表面标记物CD29、CD44、CD90和CD105的表达情况。

将促红细胞生成素溶于生理盐水中，配制成所需浓度的药液。

在脊髓损伤后即刻、1天、3天和7天，分别给予BMSCs治疗组和联合治疗组大鼠促红细胞生成素药液注射。

给药

制备

建立

采用改良Allen打击法建立大鼠脊髓损伤模型，即使用一定重量的打击器从一定高度落下，撞击大鼠脊髓部位。

评估

在脊髓损伤后不同时间点（1天、3天、7天、14天和28天），对大鼠进行行为学评分、组织学观察和影像学评估，以评价脊髓损伤程度和治疗效果。

03

实验结果

存活率

通过荧光标记和组织学观察，发现BMSCs在脊髓损伤部位有较高的存活率，且能够长期存活。

分化能力

BMSCs在脊髓损伤部位可向神经元和胶质细胞分化，表达相应的特异性蛋白和基因。

增殖作用

促红细胞生成素能够促进BMSCs的增殖，增加细胞数量。

分化作用

促红细胞生成素可诱导BMSCs向神经元和胶质细胞分化，提高其分化效率。

与单独使用BMSCs或促红细胞生成素相比，联合治疗能够更显著地促进大鼠脊髓损伤后运动功能的恢复。

运动功能恢复

联合治疗组大鼠运动功能恢复时间较单独治疗组缩短。

恢复时间

VS

联合治疗后，大鼠脊髓损伤部位的病理改变明显减轻，包括炎症反应、水肿和坏死等。

组织修复

联合治疗可促进脊髓损伤部位的组织修复和再生，包括神经元和胶质细胞的再生以及轴突的生长和连接。

病理改变减轻

04

讨论

神经再生促进

免疫调节

血管新生

BMSCs能够分泌多种神经营养因子，如神经生长因子（NGF）、脑源性神经营养因子（BDNF）等，促进损伤脊髓神经的再生和修复。

BMSCs具有免疫调节作用，能够抑制炎症反应，减轻脊髓损伤后的免疫排斥反应和组织损伤。

BMSCs可以促进血管新生，改善脊髓损伤部位的微环境，为神经再生提供必要的营养和支持。

1

2

3

促红细胞生成素可以促进BMSCs的增殖和分化，增加其在脊髓损伤部位的数量和活性，从而增强治疗效果。

促进BMSCs增殖和分化

促红细胞生成素可以改善脊髓损伤部位的微环境，促进血管新生和神经营养因子的分泌，为神经再生提供更有利的条件。

改善局部微环境

促红细胞生成素可以减轻脊髓损伤后的继发性损伤，如水肿、炎症等，保护受损神经细胞，促进神经功能恢复。

减轻继发性损伤

联合治疗方案结合了BMSCs和促红细胞生成素的优点，能够相互促进，提高治疗效果。同