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紫外分光光度法测定Vc含量

1.实验原理

维C在紫外光区（200-400nm）显示特征的吸收谱带，最大光吸收（λmax）为245nm。因此可以用标准曲线法在245nm测样品吸光度，测得维C含量。

2.实验试剂

(I)1％的HAc溶液

(2)100ug/ml的Vc标准贮备液：准确称取0.010g的Vc，用1％的HAc定容至100mL。

(3)Vc标准使用液：吸取贮备液5．00mL，用1％HAc稀释至250mL(现用现配)。

(4)比色皿清洗剂

3.实验步骤

3.1Vc的提取

称取剪碎混匀的新鲜样品0.5～1.0g加酸研磨，多次过滤至50ml容量瓶中定容。吸取10ml待测液溶液于试管。

3.2标准曲线的绘制

分别吸取0.00、1.00、2.00、4.00、8.00、10.00ml维生素C标准溶液于10ml比色管中用酸定容，用水稀释成一系列浓度分别为0.0、10、20、40、80、100μg/mL维生素C标准溶液，分别测出其吸光度。然后以浓度为横坐标，以相应的吸光度为纵坐标绘制出标准曲线。该曲线是经过原点的一条直线，可求出该曲线的斜率。

3.3Vc的测定

波长245nm处测定。