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药敏试验抑菌圈直径判断标准
一、药敏试验操作步骤
1、制作待检菌液
在超净工作台内挑取培养18-24h普通营养琼脂平板上的菌落，悬
于含3ml无菌生理盐水的试管中。混匀后与比浊管比浊，调整浊度至
0.5麦氏标准（相当于1-2*10cfu/ml）。
2、接种细菌
在超净工作台内用无菌棉拭子蘸取菌液，在管壁上挤压去掉多余
的菌液，均匀涂抹整个平板表面，最后沿平板内缘涂抹一周（用接
种环密集划线法也可以）。
3、贴药敏片
将涂抹均匀的培养皿底部用记号笔做好标记，眼科镊子在酒精灯
上灼烧灭菌待冷却后，镊取各种购买或自制的药敏片，分别贴于相
应的位置上，用镊子轻轻按压纸片使药敏纸片与培养基表面密贴。
药敏纸片应在培养基表面均匀分布，各纸片距中心距离大于24mm，
纸片距边缘距离大于15mm，这样一个直径90mm的培养皿可贴7个药敏
纸片。
4、培养
最后将贴好药敏纸片的平板倒置于37℃±1℃恒温培养箱，培养
16-18h后取出，观察结果。
二、结果观察与判定
1、抑菌圈直径观察
抑菌圈直径以肉眼见不到细菌明显生长的边缘为限（变形杆菌可
蔓延生长至某些抗微生物的抑菌圈内，表现为一种细薄微弱的生长，
形成一层明显的抑制性生长环，对于这种情况应忽略不计；对于磺
胺类药物，应忽略抑菌圈内轻微的细菌生长，少于20%的菌苔，以明
显的边缘为抑菌圈直径）。
2、根据药敏片周围抑菌圈的大小，判定药物的敏感度
敏感：表示被测菌株所引起的感染可以用常用量该抗菌药物治
愈。
中介：表示被测菌株对常规用药体液或组织中的药物浓度的反应
率低于敏感菌株，使用高于正常给药量有疗效。
耐药：表示被测菌株不能被常用剂量药物抑制，临床疗效不佳。
3、判定
不同菌株结果判定标准不同；不同药物判定标准不同。最终判定
结果应以WS/T125-1999列表中对应的标准为准。也可以根据以下标
准进行判定：
备注：商品要通常按照说明书用量原倍配置药敏纸片，可视情况
做2倍、4倍浓度配置；商品药敏感性判定通常抑菌圈直径﹥20mm
极敏；15-20mm高敏；10-14mm中敏；＜10mm不敏感；某些原料药
按国标规定判定，没有具体依据的通常也按照﹥20mm极敏；15-20mm
高敏；10-14mm中敏；＜10mm不敏感判定；抑菌圈大小使用游标卡
尺精准测量，也可用直尺粗略测量（测直径）。
三、注意事项
1、要求待检病料新鲜、无污染。
2、整个试验操作过程注意无菌操作。
3、培养基厚度：要求厚度为4mm，直径90mm的培养皿约25ml/平
皿；菌液一定要比浊；尽量选用同一品牌、大小相同的棉拭子涂布
细菌；自制药敏片的厚度必须是新华1号滤纸。
4、药敏片保存：长时间不用置于-20冷冻保存，平时常用可放于
4-8℃冷藏；药敏片从冰箱拿出要与室温平衡20min后打开盖使用，
以免潮湿影响结果。
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