EDTA 脱钙液使用说明书.pdf

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EDTA脱钙液使用说明书

储存条件:常温保存,有效期1年。

产品内容:

ComponentsSL1500-500ml

EDTA脱钙液(pH7.2-7.4)500mL

说明书1份

产品说明:

1.在病理实验制作切片时,我们会经常碰到一些含钙组织,而且钙十分坚硬。由于组织中

的钙和石蜡之间的密度不同,含钙的组织一般不能直接制作切片。骨组织含钙量最多。

除了骨组织之外其它组织也可发生钙化,在组织中形成钙化区,所以需要经过脱钙过程。

脱钙是制作骨组织切片的重要环节,尤其是要进行免疫组织化学染色的骨组织。

2.为达到骨组织既充分脱钙,又保护骨组织中的抗原不受破坏,需要对含钙的组织固定之

后再进行脱钙。然后再行常规制片。

3.EDTA与羟基磷灰石结晶的外层钙结合,形成可溶性的非离子化合物,同时又促进晶体

内层的结合钙向外转移。借助这种连续性的作用使羟基磷灰石晶体逐渐融解,pH中性

时可起螯合作用。其特点是脱钙时间长,对骨组织的损伤少,酶活性(碱性磷酸酶)和细

胞抗原性保存较好,制作的切片可用于组织化学和免疫组化分析。

4.主要用途:用于骨组织、牙齿等脱钙。

使用说明:

1.骨组织脱钙时,取材不易过厚,一般大约5mm。

2.组织固定后,用PBS清洗3次,每次20min。

3.组织用蒸馏水洗清洗3次,每次20min。

4.组织转移至20~30倍体积的EDTA脱钙液中,脱钙10~30天或更长时间。如果想

加快脱钙速度,可以置于37℃进行脱钙。如果必要,更换新的EDTA脱钙液继续脱钙,多

数组织脱钙2周~3个月即可,每周更换一次,直至终点。亦可采用微波快速脱钙法:微

波炉设在200W左右的档位,每次加热5min,依据组织厚度和密度重复3~5min,中间间

隔3~5min。

5.用蒸馏水冲洗数次。

6.常规脱水、包埋。

注意事项:

1.为使脱钙更为充分,每次最好更换新液,这既弃去脱掉的钙盐,增加脱钙强度,又起到

降低脱钙的温度。

2.脱钙时间以大头针能刺进骨密质为完成脱钙标准。

3.脱钙温度不要太高,一般以室温(25℃)为宜,高温可加快脱钙速度,但可破坏组织中的

核酸而影响染色效果。低温(4℃)则会减慢脱钙速度。使组织在脱钙液中浸泡过久而引起损

伤。

4.为了提高EDTA的脱钙速度,骨组织取材尽量取薄。

5.为了提高EDTA的脱钙速度,也可以采用微波脱钙。用微波炉辅助脱钙可以大大缩短脱

钙时间,以微波间歇脱钙,每次辐射1分钟,每次辐射之间都将烧杯移至室温冷却5分钟,

以保证每次的微波辐射脱钙液的温度不至于太高(70℃)。脱钙时脱钙液温度过高,易导致假

阴性,背景色深等缺点。因此,在时间要求不紧迫的前提下,该方法也不应是首选。

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