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微生物检验中的免疫学技术

传统的和现代的抗原-抗体反应在微生物的鉴定和微生物感染诊

断中均具有重要意义。

一、传统的抗原-抗体反应

（一）凝集反应

原理：颗粒性抗原与相应的抗体在合适的浓度比例下、在合适的

反应条件下（温度、pH、盐离子和反应时间等）可发生凝集反应。应

用：用已知抗原检查抗体，或用已知抗体检查抗原。它是细菌鉴定的

重要技术。

1.直接凝集反应

多为在实验室制备多价或单价抗血清用来检查细菌的抗原而鉴

定细菌。主要的应用有以下几个方面。

（1）沙门菌的血清型鉴定：沙门菌的菌体或鞭毛的抗原结构不

同。实验室应用成套的多价和单价的抗血清依凝集反应而分出血清型。

以前沙门菌的命名就依血清型别的差异。如今虽不以此定种，血清型

仍需确定以资鉴别，且需将抗原结构写于菌种名后。

（2）大肠埃希菌的血清型鉴定：致腹泻性或尿道或血流感染性

的大肠埃希菌的血清学鉴定有助于确定其致病性（如产志贺毒素大肠

埃希菌O157等），也可鉴别各种类型的致腹泻大肠埃希菌，也是流行

病学和流行菌株调查的重要技术。

（3）志贺菌的血清学鉴定：志贺菌的种别与型别由与多价和单

价抗血清的凝集而确定。

（4）在耶尔森菌、弯曲菌、军团菌，流感嗜血杆菌、脑膜炎奈

瑟菌等的鉴定中也用直接凝集反应。分析菌株的血清型与其致病性、

毒力和流行特征密切相关。

2.间接凝集反应

利用载体，如葡萄球菌A蛋白、链球菌G蛋白和固相载体，如含

A蛋白的葡萄球菌菌体，聚苯乙烯（latex）粒子、明胶粒子、炭末、

胶体金、胶体硒等包被已知的抗体来检查抗原（病毒、细菌、支原题、

衣原体等抗原）；也可包被已知的抗原来检查患者血清中的抗体。此

类间接凝集试验应用很广，已有不少的商品试剂盒。主要有：

（1）筛查梅毒患者的VDRL（veneraldiseaseresearch

laboratory，美国性病研究实验室法），RPR（rapidplasmareaction，

快速血浆反应）和USR（unheatedserumreaction，不加热血清反

应）试验系将非梅毒螺旋体的抗原（类脂质，反应原）结合于粒子表

面来筛查梅毒患者血清中的抗体（反应素）。如以梅毒螺旋体的可溶

性抗原结合在粒子表面则可检查患者血清中的特异性抗体，作为确证

试验。

（2）同时检查多种病原体抗原的粒子凝集试验：如同时检查脑

脊液中肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和脑膜炎奈瑟菌的Latex凝集试验。

同时检查脑脊液中疱疹病毒、腮腺炎病毒和腺病毒的Latex凝集试验。

我国自行开发出自咽部标本检查A型流感病毒H5N1的快速诊断试验。

（3）直接自粪便悬液中检测轮状病毒的Latex凝集试验。

（4）检查产毒素大肠埃希菌的不耐热毒素（LT）、耐热毒素（ST）

的凝集试验。

（5）自体液或血液中检查真菌抗原的凝集试验以快速诊断深部

真菌感染。

（6）链球菌的抗原分群。以分群抗体分别包被于Latex粒子，

将自菌体提取的抗原进行凝集反应可用于链球菌的分群。

（7）自标本中检查病毒抗原的间接凝集试验。

（二）沉淀反应

原理：可溶性抗原与相应的抗体在合适的浓度比例下、在合适的

反应条件下（温度、pH、盐离子和反应时间等）可发生沉淀反应。

1.用已知的微生物抗原或抗体通过双向琼脂扩散试验可鉴定相

应的抗体或抗原。

2.用单向琼脂扩散或火箭电泳试验可鉴定和粗略定量微生物抗

原或抗体。

3.免疫光散射或免疫浊度测定技术，可精密地定量微生物抗原或

抗体。

（三）补体结合反应

此种技术较前二者的特异性和敏感性好。现虽已应用不多，但在

一些病毒性疾病的诊断中仍有重要作用。

二、现代的抗原-抗体反应

近年迅速发展起来的各种形式的标记免疫分析已成为微生物