AKTA实验室层析柱装柱技术介绍.pptx

试验室层析柱装柱技术介绍AKTA实验室层析柱装柱技术介绍第1页

Columnpacking好柱效是层析成功关键不一样种类凝胶、不一样层析柱有不一样装柱方法柱效测定方法层析柱维护AKTA实验室层析柱装柱技术介绍第2页

ColumnpackingRabiesvaccineSepharose4FastFlow5%columnvolsampleAKTA实验室层析柱装柱技术介绍第3页

ColumnpackingmlmAU*ml(volume)%mAUNoRetAreaArea/PeakareaHeight136.2727.839484.458.2182118.245.126715.550.649每米塔板数：N=1600mlmAU*ml(volume)%mAUNoRetAreaArea/PeakareaHeight136.1450.632598.4816.9742118.540.77911.520.131每米塔板数：N=3500AKTA实验室层析柱装柱技术介绍第4页

ColumnpackingN/m=5.54(Ve/Vh)2100/LAs=b/aAKTA实验室层析柱装柱技术介绍第5页

Columnpacking检测装柱效果普通用0.5%(30um介质)或1%(90um介质)柱体积1%丙酮测柱效和峰形Thelinearflowrateshouldbe30cm/hfor34μmand50μmmediaand20cm/hfor90μmmediaAKTA实验室层析柱装柱技术介绍第6页

线性流速对体积不一样柱子来说，体积流速不能直接用作比较，普通都换算成线性流速，再作比较： 体积流速(ml/min)x60线性流速(cm/hr)=揪揪揪揪揪揪 柱子横切面积(cm2)Columnpacking2024/6/20AKTA实验室层析柱装柱技术介绍第7页

ColumnpackingItisimportantthatthecolumnisproperlyequilibratedbeforethepackingisevaluated(~2columnvolumes).Itispreferabletorunthreetestrunstoseewhetherthetestvaluesarestable.Ifapoorresultimprovesduringthistest,thereasoncanbethatthecolumnwasnotproperlyequilibrated.Tocheckthatthebedisstable,runthecolumnat70%packingpressurefor20hoursandtestitagain(preferablythreetestruns).Notethatpressurespikesmaycausepoorpacking(cracking).Ifthishappens,anairtrapandapressurereliefvalveareneededbetweenthepumpandthecolumn.Thepressurereliefvalveshouldbeplacedbetweentheairtrapandcolumn.AKTA实验室层析柱装柱技术介绍第8页

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装柱注意点选择一根设计良好柱子仔细混合均匀凝胶浆在生产时使用柱子温度下装柱用平缓动作将凝胶浆一次性加入柱子中用恒压或恒流装柱稳定和平衡凝胶柱床检验柱效，必要时重装ColumnpackingAKTA实验室层析柱装柱技术介绍第10页

用空柱子须留心.使用调整器(flowadaptor)-保护柱床同时更可提升分辨率