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微生物检验实验室李斯特菌属标准操作规程

1.概述

李斯特菌属包括产单核细胞李斯特菌、伊氏李斯特菌、斯氏

李斯特菌等菌种,其中产单核细胞李斯特菌对人和动物致病。

2.标本类型

血液、脑脊液、尿液、痰、穿刺液、脓液标本。

3.鉴定

3.1形态与染色:革兰阳性小杆菌,大小为(0.4~0.5um)×

(1~2um),直或微弯,常呈V字形成对排列,偶尔可见双球状;

无芽胞,无荚膜,在22~25℃形成周鞭毛,有动力,37℃时

鞭毛很少或无。

3.2培养特性:在血琼脂平板上形成较小、圆形、光滑而有

狭窄β溶血环的

菌落;在液体培养基中呈均匀浑浊生长;在半固体培养基中,

动力自穿刺线向四周蔓延生长,呈倒伞状。

3.3生化反应:触酶试验阳性;分解葡萄糖、鼠李糖、水杨

苷,不分解蔗糖、木糖、甘露醇;吲哚、尿素酶和硝酸盐还

原试验阴性,甲基红、VP和CAMP试验阳性。

3.4鉴别要点:

3.4.1本菌特征:革兰阳性短杆菌,菌落较小,有狭窄的℃时

无动力;触酶试验阳性,37℃时有动力,25溶血环;β.

分解葡萄糖、水杨苷,不分解甘露醇。

3.4.2与肠球菌的鉴别本菌具有耐盐、耐碱、耐胆汁等特点,

易误为粪肠球菌,两者可用触酶试验加以鉴别。

3.4.3与无乳链球菌的鉴别本菌也可能因培养条件不同而

呈链状,37℃培养往往无动力,CAMP试验阳性,常误为B

群链球菌;链球菌触酶试验阴性可与之鉴别。

3.5操作步骤

3.5.1涂片染色观察菌落特征,在血平板上挑取可以菌落,

涂片染色镜检。

3.5.2触酶试验参见《触酶试验标准操作规程》

3.5.3鉴定从血平板上挑取纯菌落,用微生物鉴定仪或传

统生化反应进行细菌鉴定。

4.药敏

参见《药物敏感性试验标准操作规程》及CLSIM100-S20最

新版本文件.

5.质量控制

参见《质量控制程序》

6.检验结果解释与分析

本菌容易被认为是污染的杂菌(类白喉杆菌)而丢弃。幼龄

培养呈革兰阳性,48h后多转为革兰阴性。因此当遇到25℃

培养有动力的杆菌,而按照革兰阴性杆菌鉴定不符时,应

考虑到李斯特菌的可能。.

7.临床意义

产单核细胞李斯特菌在自然界分布很广,土壤、水、人和动

物粪便中均可存在,常伴随EB病毒引起传染性单核细胞增

多症,也可引起脑膜炎、败血症等。近年来在发达国家常因

污染奶制品引起食物中毒。

8.鉴别流程

较小、圆形、光滑而有狭窄β溶血菌落观察:

V小杆菌,直或微弯,呈字形成对排列G+涂片染色:

触酶+,25℃动力+

+CAMP试验-

其他李斯特菌产单核细胞李斯特菌

参考文献[1]中国合格评定国家认可委员会.CNAS-GL23;

2008医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验

领域的指南.2008

[2]周庭银编著.临床微生物学诊断与图解.第二版.上海:上

海科学技术出版社,2007

[3]叶应妩,王毓三,申子瑜主编.全国临床检验操作规程.

第三版.南京:东南大学出版社,2006

[4]MurrayPR.ManualO/FClinicalMircrobilogy.9th

ed.Washington:ASMPress,2007

[5]ISO15189:2007医学实验室-质量和能力认可准则.2007

编写人:AAA、BBB操作人:本室操作人员

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