2021年梅毒螺旋体抗体胶体金法.docxVIP

xxxxx检验科（SOP）标准操作程序

文件编号：xxxx

生效日期：XX年XX月

主题内容

梅毒螺旋体抗体胶体金法测定

编制人：XX

审核人：XX

共3页

梅毒螺旋体抗体胶体金法测定

1【目的】

定性检测血清或血浆中是否含有梅毒抗体

2【该SOP变动程序】

本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并经下述人员批准:专业主管，科主任。

3原理

梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒(胶体金法)采用高度特异性的抗体抗原反应及免疫层

析分析技术来定性检测血清/血浆中是否含有梅麦抗休试剂食含有被事先固定于膜上测试区（T）重组特异性梅毒抗原和质控区（C）的相应抗体。

测试时，血浆/血清标本滴入试剂盒加样孔(S)内，血标本中的梅毒抗体与预包被在膜上的胶体金结合物反应。然后，混合物随之在毛细效应下向上层析，在测试区

(T)与固定在膜上的重组特异性梅毒抗原反应。如果血清中含有抗梅毒抗体，在测试区内(T)会出现一条紫红色条带，表明时阳性结果。如果在测试区内(T)没有出现紫红色条带，则血标本中不含有抗梅毒抗体，表明是阴性结果。无论抗梅毒抗体是否存在于血标本中，混合物都会继续向上层析至质控区(C)，质控区的相应抗体与胶体金结合物反应出现一条紫红色条

带。质控区内(C)所显现的紫红色条带。质控区内(C)所显现的紫红色条带是判定层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。

4标本采集与处理:

4.1受检者准备:

4.1.1受检者的状态:

a.不可变的生物因素:年龄，性别，生活环境遗传;

b.可变的生物因素:

A)情绪:原则上患者应在平静，休息的状态下以晨起空腹时采集标本，患者对采集标本时的恐惧、紧张会造成标本采集的失败。

B)运动:受检者应处于平静状态下采集标，可减少由运动带来的影响。

C)生埋节律变化:昼夜的生理变化可能使测定结果不恒定，晨起固定时间空腹血尽可能减少昼夜节律带来的影响。

4.2采取标本时:

A)体位:除非是卧床的病人，一般采血时取坐位。

B)止血带:一般从肘静脉采血使用止血带的时间不宜超过1min，穿刺成功后立即松开止血带，静脉阻滞也可影响。

4.3受检者的饮食:餐后采集的标本，易发现乳糜状，影响检验测定的正确性，故应嘱受检者采晨起空腹血为宜。

4.4药物的影响:目前文献尚无发现对其影响的报道，有待进一步完善。

4.5输血及输液的影响:标本采集应避开输血及输液侧。

4.6标本的采集、保存、送检及处理。

4.61标本的采集:

A:种类:新鲜血清或血浆。

B:时间:原则上以晨起空腹时采集标本。

C:静脉采血:首选肘静脉，必要时采集其它静脉。

D:采集方法:按照常规标本采集方法采集。

E:容器要求:标本应采集至真空管(含或不含分离胶的普通生化管)管上应标有病人姓名、床号、科室、住院号或条形码唯一标识。

F:标本采集量:一般常3ml全血，无需抗凝防腐，血清或血浆至少需600ul。

4.62标本拒收标准:

A严重的溶血、脂血标本。

B:血量不足。

C:采集的标本离送检时间过长。

D:用错采血容器。

E:唯一性标志错误或不清楚。

F:输血、输液中采集的标本或同侧采血。

G:其它

4.6.3标本的处理方法:标本采集后应尽快送实验室，检验科核对标本后，双方登记签字确认，转送免疫室。免疫室人员进行编码后立即离心，按常规方法分离血清。

4.6.4标本储存预知:血清储存于

4℃-20℃，10天内稳定，室温放置，2d内稳定，如当日不能测定，推荐将血清保存于-20℃一周内完成测定。

5试剂:本试剂购自英科新创（厦门）科技股份有限公司。

A:试剂盒组份:

梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒(胶体金法)

50人份

一次性塑料吸管50人份

B:试剂盒应储存于4-30℃，阴凉处，有效期24个月。

6操作步骤:

在进行测试前将试剂和标本恢复至室温(20-30℃)。

61将试剂盒置于干净平坦的台面上，用塑料吸管吸取血清/血浆标本，垂直滴入1滴(约25ul)于加样孔S中，然后加入2滴缓冲液(约75ul)于加样孔S中。

6.2等待紫红色条带的出现，在15分钟内读取测试结果。关键要注意，在紫红色条带出现以前，背景要清晰，特别当样本中含有低滴度的抗梅毒抗体，会导致出现的T线颜色很淡，此时更需注意背景清晰。在30分钟后读取放入结果无效。

7结果判断:

阳性(+):两条紫红色条带出现。一条位于测试区内(T)，另一条位于质控区内(C)内。阳性结果表明:标本中含有梅毒抗体。

阴性(一):仅质控区(C)出现一条紫红色条带，在测试区内(T)无紫红色条带出现。阴性结果表明:标本中检测不出梅毒抗体。

无效:质控区(C)未出现紫红色条带，表明不正确的操作过程或试剂盒已变质损坏。在此情况下，应重新测试。如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号产品，并与当地供应商联系。

注意:由于样本中