橘子中Vc含量的测定与分析课件.pptxVIP

橘子中Vc含量的测定与分析制作者卢娉婷同组成员谢晓雯

【实验目的】初步学会水果中Vc的测定；了解Vc的功能，在日常生活中能合理膳食。

【实验原理】Vc又名抗坏血酸，是人体维持生命不可缺少的营养成分之一。其生理功能是促进人体胶原蛋白的合成、参与体液中的氧化还原反应及解毒等。在蔬菜和水果中，含人体所需的多种营养成分，其中，Vc作用突出。

【实验原理】Vc的测定方法主要有紫外分光光度法、红外光谱法、2,6-二氯靛酚滴定法、高效液相色谱法、原子吸收法、碘量法等。其中原子吸收法、高效液相色谱法的仪器相对昂贵；碘量法操作步骤繁琐，且受其它还原性物质、样品色素颜色和测定时间的影响；紫外分光光度法是根据Vc对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性，于243.4nm[1]处测定样品液与碱处理样品液两者的吸光度之差，通过标准曲线，即可计算样品中Vc的含量。[1]从参考文献中获得

【仪器与试剂】材料：新鲜的橘子试剂：抗坏血酸、HCl（1%/10%）、NaOH（1mol·L-1）、蒸馏水仪器：紫外可见分光光度计、电子天平（备注：紫外可见分光光度计的波长使用范围一般为190nm-1100nm，可见光分光光度计的波长使用范围一般为360nm-780nm。）

【实验步骤】·标准溶液的配制准确称取0.050g抗坏血酸，加10mL10%HCl溶液，用蒸馏水定容至500mL，混匀，即得100μg·mL-1Vc标准溶液。·标准曲线的绘制分别准确移取100μg·mL-1Vc标准溶液0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL、3.0mL、3.5mL、4.0mL、4.5mL、5.0mL于50mL容量瓶中，定容至刻度。以蒸馏水为参照，在243.4nm处测定吸光度，以Vc浓度为横坐标、吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

【实验步骤】管号0Vc准溶(mL)Vc含量(μg)0吸光度010.51.01.52.02.53.03.54.04.55.0502100150200250300350400450500345678910

【实验步骤】·样品的处理将橘子取肉，称取10.00g于研钵中，加入1%HCl10mL，匀浆，转移到50mL容量瓶中，稀释至刻度，混匀，移至离心管中离心10min，取上清液即为待测液。取1.0mL待测液，放入盛有2mL10%HCl的50mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。以蒸馏水为空白，在243.4nm处测定吸光度。再取1.0mL待测液、10mL蒸馏水和4mL1mol·L-1NaOH溶液放入50mL容量瓶中，摇匀；静置20min后加入4mL10%HCl，混匀，并定容至刻度。以蒸馏水为空白，在243.4nm处测定其吸光度。

【实验步骤】·吸光度的确定待测提取液与碱处理提取液的吸光度之差即为样品吸光度。·Vc含量的计算测得样品的吸光度后，依据标准曲线方程，即可计算出果蔬中Vc的含量[mg·(100g-1)]。Vc含量=c*V*V*100/(V*W*1000)总待测总1总[备注：c为依标准曲线方程计算得到的Vc浓度(μg·mL-1)；V为测吸光度时吸取待测液的体积(mL)；V总1为吸取样品定容总体积(mL)；V待测总为待测液总体积(mL)；W为橘子质量(g)；100为100g橘子。]总

【实验流程】配制标准溶液绘制标准曲线提取待测液碱处理待测液‘测定吸光度测定吸光度减去A243.4A243.4’样品的吸光度

【注意事项】维生素C还原性很强，在空气中易被氧化，在酸性介质中氧化作用减慢，水溶液在pH=5~6之间稳定。