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毕赤酵母发酵不同单糖产乙醇的研究
王靖;李智敏;谢纯良;严理;朱作华;胡镇修;彭源德
【摘要】以毕赤酵母CBS6054(Scheffersomycesstipitis)为试验菌株,用葡萄糖和半乳糖2种六碳糖,木糖和阿拉伯糖2种五碳糖分别作为惟一碳源进行发酵试验,测定毕赤酵母在不同培养基中的生长曲线、糖消耗情况、产物乙醇生成情况,由此研究该菌株发酵不同单糖的能力以及对应的产乙醇的潜力.结果表明该菌株对葡萄糖和木糖的发酵能力较强,且两者发酵情况相当;发酵半乳糖的能力居中;发酵阿拉伯糖的能力较弱.乙醇产量从高到低依次是葡萄糖、木糖、丰乳糖、阿拉伯糖.
【期刊名称】《湖北农业科学》
【年(卷),期】2016(000)003
【总页数】4页(P716-719)
【关键词】毕赤酵母(Scheffersomycesstipitis);五碳糖;六碳糖;燃料乙醇
【作者】王靖;李智敏;谢纯良;严理;朱作华;胡镇修;彭源德
【作者单位】中国农业科学院麻类研究所,长沙410205;中国农业科学院麻类研究所,长沙410205;中国农业科学院麻类研究所,长沙410205;中国农业科学院麻类研究所,长沙410205;中国农业科学院麻类研究所,长沙410205;中国农业科学院麻类研究所,长沙410205;中国农业科学院麻类研究所,长沙410205
【正文语种】中文
【中图分类】Q939.97
生物燃料乙醇是一种清洁型的可再生资源,可以通过微生物发酵生物有机质得到,是一种有发展前景的液体燃料。传统的乙醇生产是以粮食为原料,现在人们尝试以木质纤维素(如秸秆、谷壳、木屑等废弃物)为原料生产乙醇,每年全球产生的木质纤维素约占生物资源的一半,大约100~500亿t[1],利用这部分资源不仅可以降低生产燃料乙醇的成本,还有利于保护自然环境,实现可持续发展。
木质纤维素中纤维素含量最多,占干重的45%,半纤维素含量次之,占干重的30%[2,3]。纤维素水解后生成葡萄糖,半纤维素水解后生成五碳糖(如木糖、阿拉伯糖)和六碳糖(如半乳糖、甘露糖和葡萄糖)。除葡萄糖外,若能充分利用木质纤维素中的木糖,可使乙醇产量再增加25%[4,5]。从自然界中筛选到的能利用木糖发酵产乙醇的酵母菌中,树干毕赤酵母(Scheffersomycesstipitis)具有较好的应用前景[6-8]。目前,鲜见关于此类酵母对多种单糖发酵效果的比较研究。利用毕赤酵母发酵不同单糖产乙醇,使纤维素水解液中的成分能得到充分利用,这对于降低燃料乙醇的成本,提高乙醇产量具有重要的意义。根据纤维原料水解后产生的单糖种类特征,本研究选取了2种六碳糖(葡萄糖和半乳糖),2种五碳糖(木糖和阿拉伯糖)分别作为培养基的惟一碳源,利用毕赤酵母CBS6054菌株进行发酵,记录发酵过程中菌株的生长情况和单糖的消耗情况,并测定发酵中对应的乙醇产量,为了解毕赤酵母CBS6054菌株对不同糖类的发酵特性、开发工业化的五碳糖和六碳糖共发酵产乙醇菌株奠定理论基础。
1.1材料
1.1.1试验菌株毕赤酵母CBS6054由中国农业科学院麻类研究所菌种资源库提供。
1.1.2主要试剂葡萄糖(阿拉丁试剂有限公司),木糖(上海楷洋生物技术有限公司),氢氧化钠(湖南汇虹试剂有限公司),亚硫酸氢钠(天津市大茂化学试剂公司);阿拉伯糖、半乳糖、3,5-二硝基水杨酸、结晶酚、酒石酸钾钠均为国药集团化学试剂有限公司,均为分析纯。
1.1.3主要仪器电子分析天平(UX6200H型,日本岛津制作所);立式压力蒸汽灭菌器[GR110DR型,致微(厦门)仪器有限公司];气浴恒温振荡器(THZ-82B型,江苏金坛市医疗仪器厂);离心机(TGL-16C型,深圳安科高技术股份有限公司);细胞计数仪(TC20型,BIO-RAD公司);电热恒温水浴锅(HH·SY21-Ni型,北京长源实验设备厂);烘箱(上海福玛实验设备有限公司);酶标仪(MultiskanGO型)、气相色谱仪(TRACE1300型),ThermoScientific公司;超纯水器(湖南科尔顿水务有限公司)。
1.2方法
1.2.1发酵液样品的制备按表1配制5种不同的培养基,装入三角瓶中,同一时间接种活化后的CBS6054菌液,在30℃180r/min的摇床中培养,发酵0、8、16、24、32、40、48、56、64、72h共10个时间点取样,取发酵液4mL于离心管中,10000r/min离心2min,把上清液转移到新的离心管中,保存于-70℃冰箱待测。
1.2.2生长曲线测定接种后在发酵0、8、16、24、32、40、48、56、64、72h共10个时间点,将培养液混匀后取10μL用细胞计数仪进行计数,每个时间做3次重复,取3次的平均值用于生长曲线的制作。
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