血红蛋白含量的测定血型鉴定.pptxVIP

试验目标掌握血红蛋白测定方法；学习判定血型基本方法，观察红细胞凝集现象，掌握ABO血型判定原理。血红蛋白含量的测定血型鉴定第1页

测定血红蛋白意义人血红蛋白参考值成年男性：13--15克/dl；成年女性：11--14克/dl；儿童：（依年纪而异）12--14克/dl。临床意义：大致与红细胞增减相同。高原地域居民血红蛋白浓度普通比平原居民为高，这是机体对低气压环境一个适应现象。普通来说，在疾病情况下，血红蛋白增减是与红细胞改变相平行，即引发红细胞增多疾病，也会使血红蛋白含量增加。使红细胞降低疾病，也使血红蛋白含量降低。在贫血时，血液中红细胞数量和血红蛋白浓度都有不一样程度下降，但不一定按相同百分比改变。有时红细胞数量能够降低很多，而血红蛋白浓度降低却相对地不那么显著，见于大细胞性贫血，因为单个红细胞所含血红蛋白量较正常者为多。相反，也有红细胞降低得不很多，而血红蛋白浓度却显著降低，比如缺铁性贫血，这是因为每个红细胞血红蛋白含量比正常显著降低，故血红蛋白减低程度较红细胞降低更为显著。依据检验结果，分析病因，做到准确诊疗和治疗都是很必要。血红蛋白含量的测定血型鉴定第2页

基本原理血红蛋白是红细胞主要成份，在正常情况下，每个红细胞均含有一定量血红蛋白。血红蛋白是由珠蛋白和亚铁血红素组成结合蛋白质。血红蛋白除能与氧结合形成氧合血红蛋白外，尚能与一些物质作用形成各种血红蛋白衍生物。它们含有特定色泽和吸光谱，在临床上，可用以诊疗一些变性血红蛋白血症和血红蛋白定量测定。测定血红蛋白含量方法很多，试验惯用比色法。其原理是在一定量血液中，血红蛋白经少许盐酸作用，使亚铁血红素变成高铁血红素，展现较稳定棕色。用水稀释后与标准色比较，求出每100ml血液中所含血红蛋白克数。正常成年男子每100ml血液平均含14.4g，女子为13.1g。血红蛋白含量的测定血型鉴定第3页

试验原理-血型判定血型普通指红细胞血型，是依据红细胞膜外表面存在特异性抗原（镶嵌于红细胞膜上糖蛋白和糖脂）来确定，这种抗原或凝集原是由遗传决定。抗体或凝集素存在于血清中，与红细胞不一样抗原起反应，产生凝集，最终溶解，因为这种现象，临床上在输血前必须注意判定血型，以确保安全输血。血红蛋白含量的测定血型鉴定第4页

ABO血型判定试验原理抗原抗体反应——在ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A和B两种抗原，而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。A抗原加抗A抗体或B抗原加抗B抗体，则产生凝集现象→从而测知受试者红细胞膜上有没有A或/和B抗原→判断血型抗体在相邻红细胞表面抗原决定簇之间搭桥形成肉眼可见颗粒状凝集团块.见图血红蛋白含量的测定血型鉴定第5页

IgM抗体凝集红细胞示意图血红蛋白含量的测定血型鉴定第6页

IgM抗体凝集红细胞示意图IgGM在盐水介质中产生凝集血红蛋白含量的测定血型鉴定第7页

试验材料血红蛋白计、0.1mol/L盐酸溶液；载玻片、刺血针、牙签、一次性采血管、A型和B型标准血清、生理盐水、酒精棉球等。血红蛋白含量的测定血型鉴定第8页

方法与步骤-血红蛋白测定于测定管内加入0.1mol/L盐酸溶液至百分刻度20处。取20μl被检血液,快速将吸血管插入测定管底部盐酸液中，迟缓挤出血液，再吸收上部清液，重复冲洗吸血管2~3次，并混匀，静置10min。沿着管壁加入蒸馏水，逐步稀释至与标准色柱色调一致后，读取重量（或百分）刻度值汇报结果。标准制换算：血红蛋白(g/L)=血红蛋白(g/dl)×10血红蛋白含量的测定血型鉴定第9页

方法与步骤-血红蛋白测定血红蛋白计包含①标准比色架，架两侧镶有两个棕色标准玻璃色柱。②血红蛋白稀释管，有方形也有圆形。两侧有刻度，一侧以g为计数单位，对侧以百分率计，按我国情况，是以每100ml血液内含血红蛋白14.5g为100%。③20mm3血红蛋白吸管，还有玻璃棒、滴管。用滴管加0.1mol/LHCl于血红蛋白稀释管内，到刻度10处。用刺血针刺破指尖采血，血滴宜大些。用血红蛋白吸管尖端接触血滴，吸血至刻度20ul处（0.02ml）。血红蛋白含量的测定血型鉴定第10页

方法与步骤-血红蛋白测定用滤纸片或棉球擦净吸管口周围血液，将吸管插入血红蛋白稀释管盐酸内，轻轻吹出血液至管底部，重复吸入并吹出稀释管内上层盐酸，洗涤吸管屡次，使吸管内血液完全洗入稀释管内。摇匀或用小玻璃棒搅匀后，放置10min，使盐酸与血红蛋白充分作用。把稀释管插入标准比色架两色柱中央空格中，使无刻度两侧面位于空格前后方，便于透光和比色。用滴管向稀释管内逐滴加入蒸馏水（每加一滴要搅拌），边滴边观察颜色，直至颜色与标准玻璃色柱相同为止。稀释管上液面刻度读数即为每100ml血液血红蛋白克数。血红蛋