疫苗注册检验和质控方法要点专家讲座.pptxVIP

注册检验内容及流程1生产工艺审查：“制造及检定规程”是否符合基本要求生产及检定统计：是否符合制造及检定规程描述制品原液、半成品、成品检验项目、方法、结果是否符合国家药品标准及企业标准要求制品包装、标签、使用说明书是否符合相关要求国产疫苗注册进口疫苗注册生产工艺审查：是否符合基本要求制品原液、半成品、成品检验项目及方法是否符合我国药典标准新检测方法是否合理，是否有方法学验证数据按照企业注册标准检验，出具汇报书出具复核意见：1.质量标准（安全性、有效性）2.检测方法科学性，是否需要改进3.其它问题出具教授意见，补充资料和检验试剂、参考品等材料，样品进口修订进口注册标准，及修订依据按照修订进口注册标准检验出具汇报及复核意见疫苗注册检验和质控方法要点专家讲座第1页

注册检验类型新产品注册工艺变更查对新工艺（对应检测方法和指标）质量标准改变其它变更：规格，包装材料普通不包括标准和方法改变再注册（进口制品）工艺、方法、标准无改变时，只进行核档标准提升2疫苗注册检验和质控方法要点专家讲座第2页

原液抽样检测标准作为成品检测补充：1.在成品中不检测裂解剂等工艺中间步骤（灭活、纯化疫苗等）制品纯度、定性等（重组蛋白等）2.在成品中无法检测：联合疫苗（多价疫苗？）佐剂疫苗（残余DNA、内毒素、宿主蛋白等）依据以上标准，能够进行部分项目标检测3疫苗注册检验和质控方法要点专家讲座第3页

4检定项目标设置及其意义检定意义在于确保制品：安全性→制品本身：如减毒活疫苗神经毒力→工艺引进：流感疫苗裂解剂，抗生素→工艺残留：制品残留，外部污染→后期添加：防腐剂，稳定剂有效性→制品确实认（判别试验，重组蛋白分子结构）→含量测定（效力试验）稳定性或一致性：→上述检测结果分析(正确指标，如活性比)→各级/项检测标准区间疫苗注册检验和质控方法要点专家讲座第4页

5生物制品生产中检定项目标设置包含：1.起始原材料：毒种，细胞，佐剂，其它添加物质2.生产过程：收获，纯化/提取，裂解等主要工艺过程3.关键节点：原液、半成品、成品紧紧围绕着制品本身属性(类型、使用路径及目标)、控制节点，到达确保制品质量目标疫苗注册检验和质控方法要点专家讲座第5页

6以流感疫苗生产为例鸡胚(9~11日龄)流感病毒工作种子批病毒接种鸡胚尿囊腔，培养48~72小时病毒收获（尿囊液）单型病毒收获液合并病毒灭活病毒超滤浓缩判别，病毒滴度，血凝滴度，无菌，支原体内毒素，血凝滴度病毒灭活验证疫苗注册检验和质控方法要点专家讲座第6页

7以流感疫苗生产为例病毒液层析纯化病毒裂解，超滤再纯化除菌过滤单价病毒原液三价半成品成品硫柳汞血凝素含量，无菌判别，裂解剂残留，无菌判别，血凝素，无菌，pH装量，硫柳汞，卵清蛋白，内毒素，残留甲醛，总蛋白异常毒性，外观疫苗注册检验和质控方法要点专家讲座第7页

8检测方法类型效力试验判别试验安全性测定1.异常毒性，无菌2.理化测定：灭活，纯化、裂解剂等3.宿主残留（蛋白、DNA，BSA）4.工艺污染:内毒素装量，pH，外观、渗透压等普通项目疫苗注册检验和质控方法要点专家讲座第8页

9疫苗类型与效力试验考虑关键点减毒活疫苗：OPV,MMR,JE,VZV等计算病毒数量（CFU,PFU,CCID50）,其效力能够预期临床使用效果（前提？）蛋白或多糖（提取、重组类）疫苗：HBV,HPV,流脑多糖抗原性，免疫原性:定性明确，结构稳定体内试验（或由体内向体外方法过渡）灭活病毒疫苗（包含裂解、纯化）体内方法：狂犬疫苗（保护性抗原不明确）体外方法：流感疫苗（保护性抗原明确）疫苗注册检验和质控方法要点专家讲座第9页

10体内攻击模型法体内功效性抗体检测体外免疫学方法检测体外分析（理化）方法与临床效果相关性一致性愈加显著各类效力试验方法意义比较疫苗注册检验和质控方法要点专家讲座第10页

11以HPV疫苗效力试验为例Merck疫苗：体外方法夹心ELISA方法测定抗原含量，其中第二个抗体针对中和表位GSK疫苗：简化体内方法疫苗及参考品稀释后，采取单一剂量免疫小鼠，以间接ELISA法测定抗体滴度，计算疫苗和参考品比值国产疫苗：体内方法疫苗系列稀释后免疫小鼠，每组10只鼠，采血测定假病毒中和抗体，计算半数感染剂量（ED50法）完全体外方法简单体内法，抗