巨细胞病毒感染的实验室检查.pptVIP

巨细胞病毒感染的实验室检查

内容提要综述HCMV生物学性质HCMV感染的流行病学HCMV感染的临床分类HCMV感染的实验室检查一、HCMV生物学性质HCMV属疱疹病毒β亚科，是人类疱疹病毒中基因组最大的DNA病毒，CMVDNA为线性双链分子，约235-240kb。HCMV具有严格种属特异性，只能感染人类。HCMV具有增殖缓慢和潜伏--活化的生物学特性，一旦感染，将终身存在于体内。HCMV的细胞和组织嗜性非常广泛，任何器官都能受到感染。HCMV组织嗜性与宿主年龄及免疫状况密切相关。胎儿和新生儿期：神经细胞和唾液腺对HCMV最为敏感，网状内皮系统也常受累。年长儿和成人：免疫正常时，无论原发或再发感染，病毒多局限于唾液腺和肾脏，少数原发症状性感染者可累及淋巴细胞；免疫抑制个体，肺部最常被侵及，并常造成广泛组织、器官的播散型感染。眼内和颅内HCMV感染主要见于宫内感染、免疫缺陷者。①活动性感染(Activeinfection)，即产毒性感染：病毒在宿主细胞核内复制，重者产生核内包涵体，引起细胞病变，受感染细胞溶解死亡；轻者无包涵体形成，可转变为潜伏感染。②潜伏性感染(Latentinfection)：病毒潜伏在某些细胞(巨噬细胞、淋巴细胞和分泌腺细胞等)内，病毒不复制，不能分离到病毒和检出病毒抗原等复制性标志物，仅能检出HCMVDNA。当机体免疫抑制时潜伏病毒可活化增殖，形成产毒性感染。③细胞转化：HCMV基因整合至细胞DNA内，并可表达病毒抗原，细胞因而发生转化和增生。④不全感染：HCMV有少量复制，可使细胞功能产生障碍，但无或极少发生细胞形态改变。传染源感染者是唯一传染源，可长期或间歇地自鼻咽分泌物、尿、宫颈及阴道分泌物、乳汁、精液、眼泪及血液等排出病毒。CMV感染可常年发生，无季节性。原发感染尤其是先天感染者可持续排毒数年之久；再发感染者可间歇排毒。传播途径易感人群机体对巨细胞病毒的易感性取决于年龄、免疫功能状态、社会经济情况等因素。一般年龄越小，其易感性越高、症状也愈重。病毒往往以潜伏感染的形式持续终生，只有当宿主免疫状态失去平衡，潜伏的病毒才复活。发达国家，社会经济水准较高人群HCMV抗体阳性率为40％～60％，社会经济水准较低人群则达80％以上。发展中国家，80％在3岁以前感染，成人感染率近100％。我国一般人群HCMV抗体阳性率为86％～96％，孕妇95％左右，婴儿至周岁时已达80％左右。三、HCMV感染的临床分类根据感染来源分类①原发感染(Primaryinfection)，指初次感染外源性HCMV；②再发感染(Recurrentinfection)，指内源性潜伏病毒激活(Reactivation)或再次感染(Reinfection)外源性不同的病毒株或更大剂量的同种病毒株。根据原发感染时间分类①先天性感染：于出生14d内(含14d)，胎盘传播所致。②围生期感染：于出生14d内证实无HCMV感染，生后第3～12W内证实有HCMV感染，经产道、感染性母乳或生后不久输注带病毒血制品获得。③产后感染或获得性感染：在出生12W后经水平传播途径获得HCMV感染。根据临床征象分类①症状性感染：HCMV损害宿主2个或2个以上器官、系统时称全身性感染，多见于先天感染和免疫缺陷者；若病变主要集中于某一器官或系统，如肝脏或肺脏时，则称HCMV性肝炎或HCMV性肺炎。常见的HCMV感染性疾病：中枢神经系统损害、耳聋、肝炎、肺炎、单核细胞增多综合征、脉络膜视网膜炎、胃肠道疾病、心肌炎和其他心脏疾患、内分泌系统、皮肤、牙齿和牙龈发育缺损等四、巨细胞病毒感染的实验室检查诊断HCMV感染性疾病需要寻找活动性HCMV感染的实验室证据，包括以下方法:1病毒分离2病毒颗粒和巨细胞病毒包涵体检测3病毒抗原检测4特异抗体测定5特异性病毒基因(mRNA/DNA)检测1.病毒分离病毒分离是诊断活动性HCMV感染的金标准，该方法将血、尿、脐血等检测标本接种到人胚成纤维(HF)细胞，病毒感染细胞后，导致细胞发生一系列的病理学改变。由于HCMV在体外只能在HF细胞中增殖，且生长速度缓慢，检测费用高，敏感性较差，易污染，不能快速确诊，故该法不适用于临床检测，主要用于科研。近年来，将病毒细胞培养与免疫学分析方法结合建立起来的微量病毒检测技术逐渐应用于临床，如快速增强组织培养免疫荧光技术，提高了分离阳性率和检测效率，为病毒感染的早期诊断提供了重要的信息。2.病毒颗粒和巨细胞病毒包涵体检测(1)通过电镜