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叶绿体自发与次生荧光

加入吖啶橙后叶绿体自发荧光（火红色）消失了？

原因：是荧光淬灭现象所致。吖啶橙是一个芳香杂环阳离子染料可透过细胞膜，所以而推测吖啶橙阳离子是进入叶绿体膜内经过影响叶绿素分子结构或所处化学环境使自发荧光淬灭。

荧光淬灭现象定义：在产生荧光物质溶液中加入盐等物质会使溶液吸光度下降而荧光强度变小现象。

荧光淬灭现象产生原因：因为分子结构和化学环境是影响物质发射荧光和荧光强度主要原因.

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次生荧光产生来由及作用机理推测

1、次生荧光产生来由？

依据试验原理中一段话：“叶绿体吸附吖啶橙后可发出桔红色荧光。”，另外，依据试验课堂中介绍RNA橙红色荧光产生是因为吖啶橙与RNA相互静电吸引堆积在磷酸根上引发。所以我们推测，叶绿体次生荧光来由，大部分来自叶绿体吸附作用，极少部分来自叶绿体中RNA（半自主性细胞器）。

2、为何吖啶橙被吸附后会产生桔红色荧光？

经过查阅文件知道，在一定酸性条件下，吖啶橙溶液吸收与荧光光谱会伴随它浓度不一样而有迁移，低浓度时（1×10-6浓度），荧光光谱会蓝移，荧光为绿颜色，能量增加，当浓度由1×10-6提升到1×10-4时，荧光光谱会红移，此时发出是橙红色荧光。光能量降低，这些现象产生与吖啶橙结构相关，低浓度时主要以单体存在，较高浓度则以二聚体或多聚体形式存在。

参考文件：王以明，庞小峰，张玉玉等,吖啶橙受溶液pH和浓度改变光谱研究.应用化工,(4):509-513

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文字表述问题，有其是关于“渗透压”描述

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细胞膜渗透性

试验四

植物液泡系活体染色

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目标要求

经过红细胞溶血过程观察,了解分子量、脂溶性大小、电解质和非电解质溶液对细胞膜透性影响。

掌握液泡系染色原理和技术

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基本原理

细胞膜渗透性

细胞膜在不停改变环境中，必须

保持本身稳恒状态，才能生存。细

胞膜允许一些物质通透，又能降低甚

至阻挡另一些物质通透，所以细胞

膜含有选择通透性。水分子能够自由

经过细胞膜，当细胞处于低渗液环境

时，细胞很快吸水而胀裂，此时,血红

蛋白从红细胞中逸出现象称为溶血

现象。溶血现象可作为测量物质进入

红血细胞速度一个指标。在等渗液

中，因为有些溶质会进入红细胞内、

引发细胞渗透压升高，细胞也会吸水

胀裂，因为各种物质透入细胞速度

不一样，溶血时间不一样。

试验中溶血现象判断是以光线能

否透过溶液来界定。

植物液泡系活体染色

中性红为弱碱性染料，对液泡系(即高尔

基体)染色有专一性，只将活细胞中

液泡系染成红色，细胞核与细胞质完全

不着色，这可能是与液泡中一些蛋白质

相关。

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图1溶质经过简单扩散跨膜运输

甲醇：MW:32.04，结构简式：CH3OH

乙醇:Mw:46.07，结构简式：CH3-CH2-OH,

丙醇:Mw：60.10，结构简式：CH3-CH2-CH2-OH

乙二醇：Mw:62.069，结构简式：HO-CH2-CH2-OH

甘油:Mw:92.09,结构简式：HO-CH2-CHOH-CH2OH

葡萄糖：Mw：180

氯化钠：

思索：经过试验，你认为葡萄糖能否作为调整分离细胞渗透压渗透剂？为何？

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试验用具

1．器材：显微镜、解剖盘、剪刀、镊子、注射器、载玻片、盖玻片、吸管等

2．试剂：

0.85%生理盐水；

抗凝剂：肝素或Alsever；

等渗液：①0.17mol/L氯化钠、②0.32M甲醇,③0.32M乙醇,④0.32M丙醇,⑤0.32M乙二醇,⑥0.32M甘油，⑦0.32M葡萄糖。

3．材料：10%鸡红细胞，黄豆根尖

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试验步骤---细胞膜渗透性

一、鸡血细胞悬液

取50ml小烧杯一只，加1份鸡血和10份0.17mol/L氯化钠溶液，形成一

种不透明红色液体，此即稀释鸡血悬液。

二、低渗溶液

取试管一支，加入10ml蒸馏水，再加入1ml稀释鸡血，注意观察溶

液颜色改变，由不透明红色逐步澄清，说明红细胞发生破裂造成

100%红细胞溶血，使光线比较轻易透过溶液。

三、鸡红细胞渗透性

1、取试管一支，加入0.17mol/L氯化钠溶液10ml，再加入1ml稀释

鸡血，轻轻摇动，注意颜色有没有改变？有没有溶血现象？为何？

2、分别在另外6种等渗溶