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中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/T1961.10—2013
出口食品过敏原成分检测
第10部分:实时荧光PCR方法
检测虾/蟹成分
Detectionofallergencomponentsinfoodforexport—
Part10:RealtimePCRmethodfordetectingshrimpcrabcomponents
2013-03-01发布2013-09-16实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
发布
I
SN/T1961.10—2013
前言
SN/T1961《出口食品过敏原成分检测》共分为19部分:——第1部分:酶联免疫法检测花生成分;
——第2部分:实时荧光PCR法检测花生成分;
第3部分:酶联免疫吸附法检测荞麦蛋白成分:——第4部分:实时荧光PCR方法检测腰果成分;
——第5部分:实时荧光PCR方法检测开心果成分;——第6部分:实时荧光PCR方法检测胡桃成分;
——第7部分:实时荧光PCR方法检测胡萝卜成分;——第8部分:实时荧光PCR方法检测榛果成分;
——第9部分:实时荧光PCR方法检测杏仁成分;
——第10部分:实时荧光PCR方法检测虾/蟹成分; 第11部分:实时荧光PCR方法检测麸质成分——第12部分:实时荧光PCR方法检测芝麻成分
———第13部分:实时荧光PCR方法检测小麦成分; 第14部分:实时荧光PCR方法检测鱼成分;
第15部分:实时荧光PCR方法检测芹菜成分:——第16部分:实时荧光PCR方法检测芥末成分;
——第17部分:实时荧光PCR方法检测羽扇豆成分;——第18部分:实时荧光PCR方法检测荞麦成分;
——第19部分:实时荧光PCR方法检测大豆成分。本部分为SN/T1961的第10部分。
本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本部分主要起草单位:中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国江苏出入境检验检疫局、中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局、中华人民共和国浙江出入境检验检疫局、上海辉睿生物科技有限公司。
本部分主要起草人:祝长青、郑秋月、李可、吴福平、蒋原、陈颖、石建华、徐宝梁、曹际娟、张睿、沈崇钰、邵景东、张晓峰、吴亚君、杨海荣、栾军、周阳、蔡宝亮、李辉、徐君怡。
SN/T1961.10—2013
出口食品过敏原成分检测
第10部分:实时荧光PCR方法
检测虾/蟹成分
1范围
SN/T1961的本部分规定了食品中过敏原虾/蟹成分的实时荧光PCR检测方法。本部分适用于食品及其原料中过敏原虾/蟹成分的定性检测。
本部分所规定方法的最低检出限(LOD)为-0.01%(质量分数)。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
GB/T27403实验室质量控制规范食品分子生物学检测
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
过敏原allergen
又称致敏原或变应原,是指能够引起变态反应的抗原
3.2
致敏原虾/蟹成分allergenshrimpcrabcompoyhd
致敏原又称过敏原或变态反应原,是指能够使人发生过敏的抗原。虾/蟹含有多种复杂致敏成分,蛋白是其主要的致敏成分。其食用致敏症状主要表现为产生不同程度的皮肤过敏现象,如浑身发痒和
红斑等症状。本标准中致敏原虾/蟹成分即指虾/蟹特异性DNA片段。
3.3
实时荧光PCRrealtimePCR
在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号的积累实时监控整个PCR扩增过程。
3.4
Ct值cyclethreshold
每个反应管内的荧光信号达到设定的域值时所经历的循环数。
4方法提要
样品均质后,提取DNA,以DNA为模板,分别采用虾(16SrRNA)/蟹(细胞色素和16SrRNA)基因的各自特异性检测引物和探针进行实时荧光PCR扩增,观察任一对引物和探针的实时荧光PCR的
2
SN/T1961.10—2013
增幅现象,判断样品中是否存在致敏原虾/蟹成分。
5试剂和材料
除另有规定外,试
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