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艾滋病检测技术要点

;;检测CD4+、CD8+T淋巴细胞的意义

主要表现在以下几个方面：;1）了解机体的免疫状态以进行疾病分期，如美国CDC就是以此为基础制订了HIV感染者/AIDS病人的诊断和分类标准（见表4），目前国内外仍被采纳应用。

2）长期监测CD4+T淋巴细胞绝对数的变化，有助于了解患者的病情发展，决定正确的治疗方案，并观察对治疗的反应。如判断HIV感染者的临床合并症（当CD4+T淋巴细胞细胞＜200/?l时，很容易发生卡氏肺孢子虫肺炎；当CD4+T淋巴细胞50时，易发生CMV感染＝。

3）帮助确定抗HIV药物治疗及预防机会性感染治疗的适应症，如当CD4+T淋巴细胞＜200/ul时，应给予抗卡氏肺孢子虫肺炎的预防性治疗。

4）是用来评价一些新的、针对HIV的治疗方法和治疗药物疗效的重要指标。;表3BD公司应用单平台一步法建立的正常参考值范围表;早期诊断

在HIV感染的窗口期无法使用抗体检测进行诊断。而在感染早期，在抗原峰出现前后通常出现一个病毒载量的高峰，此高峰通常高于发病时的血浆病毒水平，并且有证据表明这个时期的病毒具有很高的感染能力。这个高峰在免疫系统产生反应后，尤其是在细胞免疫出现后开始下降。因此早期病毒RNA测定具有特殊的意义。该方法也可用于HIV感染孕妇所生婴儿的早期辅助诊断。

目前国际上正在尝试使用这种检测对采供血样品进行多个样品混合后的RNA检测以减少窗口期危险（降低“残余危险度”）。

;病程监控

根据HIV感染发生后病毒载量具有一定的变化规律，并且这种变化与疾病的进程有着密切的相关性。因此定期进行病毒载量的检测有助于确定疾病发展的阶段，以确定相应的治疗方案。

通常在HIV感染后无症状期内发生的感染或其它临床症状很难与AIDS发病时的症状区别，为确定一个刚发生的症状是否与HIV的感染有关，医生往往需要观察病人的实验室指标，病毒载量就是一个非常重要的指标。

;指导治疗方案及疗效判定

临床实践证明，并非在任何情况下HIV感染者都应该进行抗病毒治疗。这不单是经济上的原因，更重要的是由于抗病毒药物的副作用和疗效原因。通常在病毒载量达到一定水平后（如35，000?50，000c/ml）抗病毒??疗才具有良好的效果。

在进行治疗后，通过病毒水平的检测才能确定治疗是否有效，通常在治疗前后病毒水平降低0.5log以上才被认为临床有效。

;预测疾病进程

HIV感染后疾病进程与病毒载量的关系十分密切，观察HIV感染者病毒RNA水平可大致预测其发病的可能。病毒载量与6年发病率的关系为：500c/ml时5.4%;501?3，000c/ml时16.6%;3，001?10，000c/ml时31.7%;10，001?30，000c/ml时55.2%;30，000c/ml时则为80%。

当HIV感染者CD4+T细胞计数＜200/μl时，病毒载量与3?6个月发展至AIDS的危险为：＜10，000c/ml为4.9%;10，000?29，999c/ml为12.7%;30，000?99，990c/ml为17.7%;＞100，000c/ml为22.4%。在CD4+细胞数相同的情况下，年纪大的比年轻患者发展至AIDS的危险更大（AIDS2004；18：51-58.）。

;;HIVP24抗原的检测;HIVP24抗原检测方法

P24抗原的检测通常是采用ELISA夹心法，已知抗体包被固相反应板孔底，加入待测血清，若血清中含有P24抗原则与包被抗体形成抗原-抗体复合物，再加入酶（HRP）标记的HIV-1抗体与抗原结合，加底物显色，在酶标仪上读结果。

为了提高检测血清中P24抗原的敏感性，需先将血清中免疫复合物解离后再进行测定，目前已发展了ICDP24抗原（immun-complexdisassociate，免疫复合物解离，ICD）测定试剂，用于HIV-1P24抗原测定。

即使将复合物解离，敏感性提高，也只能在大约50%无症状感染者中检出P24抗原。

;结果报告和解释

HIV-1P24抗原的阳性结果必须经过中和试验确认，若阳性标本的OD值比中和反应前减少50%以上，才确定为HIVP24抗原结果阳性。

HIV-1P24抗原阳性仅作为HIV感染窗口期的辅助诊断依据，不能据此确诊。

HIV-1P24抗原检测的敏感性为30?90％，低于病毒载量测定。HIV-1P24抗原阴性结果只表示在本试验中无反应，不能排除HIV感染。

婴幼儿经过胎盘或哺乳从母亲获得的HIV抗体不能用于诊断是否经母婴传播感染HIV。婴幼儿体内从母亲得到的HIV抗体持续存在时间最长不超过18个月。

在18月龄以前可以用多种不同的非抗体依赖性的检验方法对新生儿HIV感染进行辅助诊断，包括：HIVP24抗原检测、病毒分离培养、RNA或DNA测定。