小分子探针技术在靶标测定中应用.pptx

小分子探针技术在靶标测定中的运用胡倩药学122

补充百链关键词：targetidentification方法论参考文献目标文献

目录靶标识别确证性能测试探针设计文献背景文献信息

文献信息杂志名称：journaloftheamericanchemicalsocietySCI分区：化学1区影响因子：近四年影响因子2013年度2012年度2011年度2010年度11.44410.6779.9079.019

文献信息标题：Cell-BasedProteomeProfilingofPotentialDasatinibTargetsbyUseofAffinity-BasedProbes发表时间：2012,134,3001?3014作者：HaibinShi,?,?Chong-JingZhang,?,?GraceY.J.Chen,?andShaoQ.Yao*,?,?

文献背景体外实验的局限性非共价结合不稳定性修饰基团对小分子性质的影响

实验流程靶标识别靶标确证探针合成探针设计性能测试获得一个合理的能代替药物进行靶标识别并易于被报告基团结合的探针分子

探针设计末端炔烃把手，用以与报告基团结合来帮助靶标识别保留嘧啶核心即药物原有的与酶结合的能力光敏部分，在紫外光下与靶标形成稳定的共价结合

探针测试分子对接实验蛋白激酶发光实验凝胶电泳分析抗恶性细胞增生实验细胞成像实验体外标记实验细菌和哺乳动物蛋白质组的标记实验

探针测试荧光素经探针处理的待测细胞裂解释放ATP待测样品监测工作液检测发光荧光素酶荧光素缓冲液蛋白激酶发光检测：蛋白激酶是一类催化蛋白质磷酸化反应的酶。达沙替尼作用于激酶的ATP口袋，影响ATP的形成萤火虫荧光素酶

靶标识别标记电泳LCMS胰蛋白酶解亲和层析得到分子量得到分子量与数据库对照得到靶蛋白信息。

靶标确证标记电泳亲和层析电泳转膜抗体处理扫描分析即westernblot能与抗体相互作用的蛋白即为靶蛋白！

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