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bfgf诱导的增殖人晶体上皮细胞内ca2调控的初步分析

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必控曲垂!』生业塞一生望地bFGF诱导的增殖人晶体上皮细胞内Ca2+调控的初步研究fll《科人学附属第医院眼科t}{研究7I-：

曲勃导师：

张劲松教授中文摘要白内障为世界上致盲疾病之首，但目前为之有效的治疗手段仍然足术治疗。

但术后，很多患者出现了晶体后囊混浊，即后发性白内(pco)、导致视力再度下降。

虽然手术或激光后囊切开足一较为有效治疗方法，但后囊膜的开通可导致视网膜脱离、黄斑水肿等严重的并症，为患者再次造成痛苦和损失。

因此，如何预防和药物治疗白内障后发障是目前眼科工作者亟待解决的迫切问题。

已证实，术后晶体上皮细胞(LEC)的残留和增殖是后囊膜混浊形成基础。

生长因子(GF)在此过程中发挥着极为重要的作用，足进术后LEC增殖，分化，移行引起后发障的主要因素，其中bFGF作用尤为突出。

研究发现：

晶体细胞内钙也有着明显地促晶体上皮细胞生长作用；子如EGF、PDGF、bFGF对某些细胞内ca2+有一定的调节作用；而钙子也有一定的调节作用，在一些实验中发现细胞内Ca2+的释放也可增神经元内bFGF的表达。

二者在细胞l勺信号转导和细胞增殖、分化着相互作用。

基于以上背景我们作出大胆推测：

在晶体上皮细胞中，GF对ca定的调节作用，这种调节引起的钙动员可能也参与了GF促细胞增殖挥着协同的作用。

因此，找出GF与ca2+的关系，发现它们的作用方阻断两者在晶体上皮细胞增殖过程中的相互作用，将为白内障尤其是和治疗提供更为广目的思路。

为证实所作推测，本实验从晶体上皮细胞内钙库通道三磷酸肌醇受Ryanodine受体(RyR)入手，首先判定它们在人晶体E皮细胞(HL达，推断它们在HLEC内ca2+调节中的作用，然后用bFGF诱导检测bFGF对HLEC内ca2+、IP3R、RyR的作用，最后通过药理反对HLEC内2+的作用途径叫：

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麴控曲趔垄虹童g!塞j《坚为进步药物阻断GF与ca2+之fhJ的{=}l瓦作用从而抑制晶体J：

皮细胞的增殖提供了理论基础。

方法第一部分：

1、人晶体上皮细胞系传代培养2、取第三代细胞，TRIzol试剂提取HLEC内和各受体距型阳性!暇组织内总RNA(阳性对照组织选自足月死婴)，RTPCR方法检测HI。

Ec内IP3RI，11，III和RyRI，Il，1IIl亚型mRNA的表达。

各引物根据NCB!公布的人类以上各受体mRNA序列及应用软件Primer3所得。

实验均重复四次，Kodak1Ddi武a1science凝胶图像分析软件分析凝胶电泳结果，计算目的基因mRNA的相对含量，作两样本均数差异的t检验。

3、取同代细胞传代与30mm培养...