低氧对食管癌Eca109细胞体外迁移及侵袭的影响.doc

PAGE1/NUMPAGES1

低氧对食管癌Eca109细胞体外迁移及侵袭的影响

低氧对食管癌Eca109细胞体外迁移及侵袭的影响#景绍武1，王雅棣2**（1.河北医科大学第四医院放疗科，石家庄050011；2.北京军区总医院放疗科，北京100700）摘要：

目的探讨低氧对食管癌迁移及侵袭能力的影响及其作用机制。

方法化学低氧法模拟肿瘤低氧微环境，半定量RT-PCR和免疫细胞化学分别检测不同低氧时相时食管癌Eca109细胞中低氧诱导因子-1（HIF-1）、E-钙黏蛋白及基质金属蛋白酶-2（MMP-2）mRNA及蛋白的表达。

Western印迹法检测雷帕霉素联合低氧处理Eca109细胞后，HIF-1、E-钙黏蛋白及MMP-2的变化。

细胞划痕试验和Transwell实验检测雷帕霉素联合低氧对Eca109细胞迁移及侵袭能力的影响。

结果Eca109细胞在低氧状态下，HIF-1mRNA无明显变化，仅蛋白表达增多；E-钙黏蛋白的mRNA表达明显降低（P0.05），蛋白表达减少；MMP-2mRNA表达明显升高（P0.05），蛋白表达增多。

雷帕霉素在低氧状态下可显著抑制HIF-1及MMP-2表达，促进E-钙黏蛋白高表达。

经雷帕霉素处理后，Eca109细胞在低氧状态下，迁移速度减慢，侵袭穿膜细胞数减少（P0.05）。

结论低氧使Eca109细胞中HIF-1蛋白表达增多，后者可能通过下调E-钙黏蛋白、上调MMP-2表达促进食管癌在低氧状态下的迁移及侵袭。

关键词：

低氧诱导因子-1；食管肿瘤；上皮型钙黏蛋白；基质金属蛋白酶-2中图分类号：

R735.1EffectsofHypoxiaonmigrationandinvasionofesophagealcarcinomaEca109cellsinvitroJINGShaowu1,WANGYadi2(1.DeptofRadiationOncology,FourthHospitalofHeBeiMedicalUniversity,ShiJiaZhuang050011;2.Departmentofradiotherapy,TheMilitaryGeneralHospitalofBeijingPLA,Beijing100700)Abstract:ObjectiveToexploretheeffectofhypoxiaonmigrationandinvasionofesophagealcarcinomaanditsmechanism.MethodsCoCl2wasusedaschemicalhypoxia-inducingreagenttomimictumorhypoxicmicroenvironment.mRNAandproteinlevelsofHIF-1,E-cadherinandMMP-2atdifferenthypoxicculturephasesweredetectedbysemi-quantitativeRT-PCRandimmunohistochemistrym,respectively.Afterbeingtreatedwithrapamycincombinedwithhypoxia,theproteinexpressionofHIF-1,E-cadherinandMMP-2wereassayedbywesternblot.Theeffectofrapamycincombinedwithhypoxiaonmigrationandinvasionweretestedbycellscratchassayandtranswellchambers.ResultsUnderhypoxia,mRNAlevelofHIF-1hadnosignificantchange,whileitsproteinlevelincreasedobviously;mRNAandproteinlevelsofE-cadherinweredown-regulated,butthemRNAandproteinle