连续培养的基本原理课件.pptVIP

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第六章连续培养的基本原理;微生物的作用:

微生物是生物反应过程的催化剂,催化原料转化为有用的产品;

微生物如同一个微小的容器,原料中的反应物透过微生物细胞周围的细胞壁和细胞膜进入微生物体内,把反应物转化为产物,接着这些产物又被释放出来。;

一、生长现象与繁殖方式

;

微生物细胞在生长过程中的变化:

其形态、组成、活性都处在动态变化过程中,使其经历生长、繁殖、维持、死亡等阶段。

并使反应系统中的环境条件也处在动态变化之中。

微生物细胞的基本组成:

蛋白质、脂肪、碳水化合物、核酸等。

;二、生长的测定;1、计数器计数法;2、测定细胞重量

;第二节微生物生长动力学;一、微生物生长曲线;二、微生物生长动力学;当微生物处在最高的生长时期,培养基中营养物过量,此时生长速率与营养物浓度无关,而与细胞浓度有关,其关系表现为微生物细胞浓度(以重量表示)的瞬时增长速率dX/dt和培养液中微生物细胞浓度X成正比,或任一瞬间生长速率与细胞浓度成正比。

;;对式(2)积分得:

;

比生长速率的意义

;Monod方程是典型的均衡生长模型,

其基本假设如下:

①细胞的生长为均衡式生长,因此描述细胞

生长的唯一变量是细胞的浓度;②培养基中只有一种基质是生长限制性基质,而其它组分为过量,不影响细胞的生长;③细胞的生长视为简单的单一反应,细胞生长速率为一常数。;Monod方程中为比生长速率(h-1);

为最大比生长速率(h-1),S为限制性基质浓度(g/L);Ks为饱和常数(g/L),其值等于比生长速率为最大比生长速率一半时的限制性基质浓度。;当一种限制性营养物浓度S大大低于Ks时,μ=μmaxS/Ks,即μ很小,此时生长很慢

当S=Ks时,μ=0.5μmax,随营养物浓度增加,μ相应增加,逐渐趋向μmax,μ成为营养物浓度的重要函数,此时营养物浓度仍是生长的限制因素,在Monod模型上表现为曲线

当S无限大时,μ?μmax,理论上最大潜力

;当营养物浓度S大大高于Ks时,营养物浓度不再影响微生物生长,即S的变化不再成为生长限制因素,此时,μ接近μmax,在Monod曲线上表???为直线

在分批培养时,Ks表示微生物对营养物的亲和力,在一定营养条件下,Ks越小,微生物对限制性营养物的亲和力越大,限制性营养物的浓度必须降低到十分低的水平,才能影响微生物的生长,Ks越大,亲和力越小,即使限制性营养物浓度很高,生长率也下降

;将Monod方程变为

并作图。通过该图,即可以获得两个

重要的动力学参数。

;;Ks和μm值随菌种、限制性基质种类的变化;Monod方程虽然表述简单,但它不足以完整地说明复杂的生化反应过程,并且已发现它在某些情况与实验结果不符,因此人们又提出了另外一些方程,归纳于下表;单基质限制的细胞生长动力学模型;第三节连续培养动力学

及连续培养的应用

现代发酵工业中,绝大多数的培养采用纯种液体培养方法,其操作方法主要有:间歇培养、连续培养和流加培养三种。连续培养是在1949年莫诺建立的,在连续培养中,将新鲜的培养基连续地加入有均匀培养液的反应器中,同时排出发酵液,使培养环境不随时间变化而改变,保持培养的稳定状态,并可以维持一个较长的时间。

;一、单级恒化器及其操作特征

恒化器:指具有恒定化学环境的反应器。在培养过程中,可灵活的制造多种培养环境来研究微生物生长、发酵的动力学特征。;;物料衡算:对于菌体:

积累的细胞=(进入–流出)的细胞+(生长-死亡)的细胞

即:dx/dt=(u-D)x

对于限制性底物:

积累的底物=(进入-流出)的底物-(生长+形成产物+维持代谢)所消耗的底物

即:ds/dt=D(s0-s)-(u/Yx/s+rp/Yp/s+ms)x

对于产物:

积累的产物=(生成-流出)的产物

即:dp/dt=rp·x-D·p;当培养处于稳态时,反应器中的菌体、底物、产物的积累量为零,即:

dx/dt=ds/dt=dp/dt=0;则单级恒化器在稳态条件下的物料衡算方程为:

菌体:D-u=0

底物:D(s0-s)-(D/Yx/s+rp/Yp/s+ms)x=0

产物:rp·x-D·p=0

;若在培养微生物菌体的特定连续培养过程中存在:

1)培养过程无产物形成,或形成得很少,忽略不计;

2)维持代谢所消耗的底物很少,忽略不计。

则:D=u;x=Yx/s(s0-s)

代入莫诺方程:s=Ks·u/um-u

整理后得:x=

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