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光学显微镜原理分析

一、光学显微镜的发展历史

早在公元前一世纪，人们就已发现通过球形透明物体去观察

微小物体时，可以使其放大成像。后来逐渐对球形玻璃外表能使

物体放大成像的规律有了认识。

1590年，荷兰和意大利的眼镜制造者已经造出类似显微镜的

放大仪器。1610年前后，意大利的伽利略和德国的开普勒在研

究望远镜的同时，改变物镜和目镜之间的间隔，得出合理的显

微镜光路结构，当时的光学工匠遂纷纷从事显微镜的制造、推广

和改进。

17世纪中叶，英国的胡克和荷兰的列文胡克，都对显微镜的

发展作出了卓越的贡献。1665年前后，胡克在显微镜中参加粗

动和微动调焦机构、照明系统和承载标本片的工作台。这些部件

经过不断改进，成为现代显微镜的根本组成部分。

1673～1677年期间，列文胡抑制成单组元放大镜式的高倍

显微镜，其中九台保存至今。胡克和列文胡克利用自制的显微镜，

在动、植物机体微观结构的研究方面获得了出色成就。

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19世纪，高质量消色差浸液物镜的出现，使显微镜观察微细

结构的才能大为进步。1827年阿米奇第一个采用了浸液物镜。

19世纪70年代，德国人阿贝奠定了显微镜成像的古典理论基

础。这些都促进了显微镜制造和显微观察技术的迅速发展，并为

19世纪后半叶包括科赫、巴斯德等在内的生物学家和医学家发

现细菌和微生物提供了有力的工具。

在显微镜本身结构发展的同时，显微观察技术也在不断创新：

1850年出现了偏光显微术；1893年出现了干预显微术；1935

年荷兰物理学家泽尔尼克创造了相衬显微术，他为此在1953年

获得了诺贝尔物理学奖。

古典的光学显微镜只是光学元件和精细机械元件的组合，它

以人眼作为接收器来观察放大的像。后来在显微镜中参加了摄影

装置，以感光胶片作为可以记录和存储的接收器。现代又普遍采

用光电元件、电视摄像管和电荷耦合器等作为显微镜的接收器，

配以微型电子计算机后构成完好的图像信息采集和处理系统。

目前全世界最主要的显微镜厂家主要有：奥林巴斯、蔡司、

徕卡、尼康。国内厂家主要有：江南、麦克奥迪等。

二、显微镜的根本光学原理

〔一〕折射和折射率

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光线在均匀的各向同性介质中，两点之间以直线传播，当通

过不同密度介质的透明物体时，那么发生折射现象，这是由于光

在不同介质的传播速度不同造成的。当与透明物面不垂直的光线

由空气射入透明物体〔如玻璃〕时，光线在其介面改变了方向，

并和法线构成折射角。

〔二〕透镜的性能

透镜是组成显微镜光学系统的最根本的光学元件，物镜目镜

及聚光镜等部件均由单个和多个透镜组成。依其外形的不同，可

分为凸透镜〔正透镜〕和凹透镜〔负透镜〕两大类。

当一束平行于光轴的光线通过凸透镜后相交于一点，这个点

称称焦点焦点，通过交点并垂直光轴的平面，称的平面，称焦平面焦平面。焦点有两

个，在物方空间的焦点，称的焦点，称物方焦点物方焦点，该处的焦平面，称的焦平面，称物

方焦平面方焦平面；反之，在象方空间的焦点，称的焦点，称象方焦点象方焦点，该处的

焦平面，称焦平面，称象方焦平面象方焦平面。

光线通过凹透镜后，成正立虚像，而凸透镜那么成正立实像。

实像可在屏幕上显现出来，而虚像不能。

〔三〕凸透镜的五种成象规律

1.当物体位于透镜物方二倍焦距以外时，那么在象方二倍焦

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距以内、焦点以外形成缩小的倒立实象；

2.当物体位于透镜物方二倍焦距上时，那么在象方二倍焦距

上形成同样大小的倒立实象；

3.当物体位于透镜物方二倍焦距以内，焦点以外时，那么在

象方二倍焦距以外形成放大的倒立实象；

4.当物体位于透镜物方焦点上时，那么象方不能成象；

5.当物体位于透镜物方焦点以内时，那么象方也无象的形成，

而在透镜物方的同侧比物体远的位置形成放大的直立虚象。

三、光学显微镜的成象〔几何成象〕原理

只有当物体对人眼的张角不小于某一值时，肉眼才能区别其

各个细部，该量称为目视分辨率ε。在最正确条件下，即物体的

照度为50~70lx