蛋白质的结构和功能.ppt

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第96页,共104页,星期六,2024年,5月5.超速离心*超速离心法(ultracentrifugation)既可以用来分离纯化蛋白质也可以用作测定蛋白质的分子量。*蛋白质在离心场中的行为用沉降系数(sedimentationcoefficient,S)表示,沉降系数与蛋白质的密度和形状相关。第97页,共104页,星期六,2024年,5月因为沉降系数S大体上和分子量成正比关系,故可应用超速离心法测定蛋白质分子量,但对分子形状的高度不对称的大多数纤维状蛋白质不适用。第98页,共104页,星期六,2024年,5月6.氨基酸序列分析*超速离心法(ultracentrifugation)既可以用来分离纯化蛋白质也可以用作测定蛋白质的分子量。*蛋白质在离心场中的行为用沉降系数(sedimentationcoefficient,S)表示,沉降系数与蛋白质的密度和形状相关。第99页,共104页,星期六,2024年,5月分析已纯化蛋白质的氨基酸残基组成测定多肽链的氨基末端与羧基末端为何种氨基酸残基把肽链水解成片段,分别进行分析测定各肽段的氨基酸排列顺序,一般采用Edman降解法一般需用数种水解法,并分析出各肽段中的氨基酸顺序,然后经过组合排列对比,最终得出完整肽链中氨基酸顺序的结果。第100页,共104页,星期六,2024年,5月通过核酸来推演蛋白质中的氨基酸序列按照三联密码的原则推演出氨基酸的序列分离编码蛋白质的基因测定DNA序列排列出mRNA序列第101页,共104页,星期六,2024年,5月7.蛋白质空间结构测定*二级结构测定通常采用圆二色光谱(circulardichroism,CD)测定溶液状态下的蛋白质二级结构含量。?-螺旋的CD峰有222nm处的负峰、208nm处的负峰和198nm处的正峰三个成分;而?-折叠的CD谱不很固定。第102页,共104页,星期六,2024年,5月*三级结构测定X射线衍射法(X-raydiffraction)和核磁共振技术(nuclearmagneticresonance,NMR)是研究蛋白质三维空间结构最准确的方法。第103页,共104页,星期六,2024年,5月感谢大家观看第104页,共104页,星期六,2024年,5月**一个共价分子是极性的,是说这个分子内电荷分布不均匀,或者说,正负电荷中心没有重合。分子的极性取决于分子内各个键的极性以及它们的排列方式。在大多数情况下,极性分子中含有极性键,非极性分子中含有非极性键。然而,非极性分子也可以全部由极性键构成。只要分子高度对称,各个极性键的正、负电荷中心就都集中在了分子的几何中心上,这样便消去了分子的极性。这样的分子一般是直线形、三角形或四面体形。分子的极性对物质溶解性有很大影响。极性分子易溶于极性溶剂,非极性分子易溶于非极性溶剂,也即“相似相溶”。蔗糖、氨等极性分子和氯化钠等离子化合物易溶于水。具有长碳链的有机物,如油脂、石油的成分多不溶于水,而溶于非极性的有机溶剂。**中性氨基酸只含有1个羧基和1个氨基,在形成蛋白质分子时都被结合掉,因此根据其侧链R有无极性再分为中性极性氨基酸和中性非极性氨基酸二个亚类,中性极性氨基酸(polarAA)较亲水(hydrophilic),中性非极性氨基酸(non-polarAA)较疏水(hydrophobic)在化学中,极性指一根共价键或一个共价分子中电荷分布的不均匀性。如果电荷分布得不均匀,则称该键或分子为极性;如果均匀,则称为非极性。物质的一些物理性质(如溶解性、熔沸点等)与分子的极性相关。非极性是指电负性相等的元素原子对共用电子对的吸引力相等,形成化学键的电荷不发生偏移(重合),极性则相反。**所有氨基酸及具有游离α-氨基的肽与茚三酮反应(氧化脱羧脱氨)都产生蓝紫色物质,只有脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应产生黄色物质。**指存在于脑组织中的各种肽。在脑内作为神经传递物质或神经传递修饰物质,而起着重要作用,对活体具有许多作用。有神经叶激素、各腺性脑下垂体激素的释放激素或抑制激素、内啡肽、脑啡肽、P物质、血管紧张素、神经细胞紧张肽、肠促胰酶肽以及胃泌素等。这些物质中很多是消化道激素,最近有人报道它们也存在于消化道中,不过其机能尚不清楚。另外有许多腺性脑下垂体激素,也在脑内发现,也应属于神经肽,这样,区别激素与神经传递物质(或者神经修饰物质)就困难了。但一般认为,同一种物质根据产生和分泌部位的不同,可以起激素作用,也可以起神经传递物质或修饰物质的作用。**多肽链主链围绕中心轴做有规律的螺旋式上升,螺旋走向为顺时针(右手螺旋).肽单位(肽平面)围绕N-

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