在微孔板中使用荧光底物测定土壤酶活性的方法 编制说明.pdf

《土壤质量在微孔板中使用荧光底物测定土壤酶活性》

征求意见稿的编制说明

一、工作简况，包括任务来源、制定背景、起草过程等

1.制定背景

土壤支撑着全球生态系统的服务功能和生态平衡，土壤健康与农业可持续发

展密不可分。土壤健康的核心是“生命力”，而土壤中几乎所有的生物化学反应都

是由酶催化进行的。酶的作用是土壤生物新陈代谢不可或缺的环节，在碳、氮、

磷、硫等主要元素的生物地球化学循环中具有重要作用，推动着土壤中的物质代

谢过程。作为土壤系统“生命力”的代表，土壤酶活性的高低是反映土壤质量的重

要生物指标。

当前，基于高通量测序技术的高速发展，土壤微生物多样性的研究已经取得

了长足的进步，但是土壤微生物功能方面的研究，由于受限于分析技术而显得相

对落后，因此有必要加强土壤微生物功能分析技术的引进和应用。土壤酶活性是

土壤微生物功能的重要体现，也可以直接指示土壤碳、氮、磷等养分元素转化能

力的高低，使用范围广泛，在农田、森林、草地、湿地等生态系统的研究中都是

常见的测试指标，尤其在当前应对全球气候变化和“双碳”背景下意义重大。标准

实施后可为土壤质量以及土壤圈物质循环的研究提供重要数据支撑，具有广阔的

应用前景。

土壤酶活性是在一定条件下，酶催化某一化学反应的速度，通常用单位时间

内底物的减少量或产物的增加量来表示。采用荧光底物法，可以同时（或单独）

测定土壤样品中参与碳、氮、磷、硫循环的多种酶活性，具有数据精密度好、准

确性高的特点。由于在分析中使用微孔板，可以大大降低分析时间、提高分析效

率，适用于土壤样品的批量检测和多种酶活的同时测定，实现土壤酶活的高通量

测定。目前，荧光底物法已在国际土壤领域得到广泛应用，但国内尚未对该分析

方法的各个流程环节，如样品的制备、标准样品的选择、过程质量控制的要求、

结果数据的处理等进行程序化要求和标准化说明，相关操作步骤尚存在较大的随

意性。

本标准提出等同采用ISO22939:2019（E）的测试方法。借鉴ISO国际标准，

规范我国土壤酶活的测试方法，确保土壤酶活测定结果的相对可比性，为我国土

壤酶活数据与国际互认提供有利条件，并推动土壤微生物学的长足发展。

2.任务来源

2024年4月25日国家标准化管理委员会下达了《2024年第二批推荐性国家

标准计划及相关标准外文版计划的通知》（国标委发[2024]18号），其中《在微

孔板中使用荧光底物测定土壤酶活性》获得批准成为2024年第二批推荐性国家

标准计划项目，计划编Z-326，主管部门为农业农村部，技术归口单

位为全国土壤质量标准化技术委员会，由中国科学院南京土壤研究所等单位承担

起草工作。本文件起草单位：中国科学院南京土壤研究所、南京林业大学、安徽

品测检测技术服务有限公司。

3.起草过程

（1）预研阶段

2023年3月，由中国科学院南京土壤研究所向全国土壤质量标准化技术委

员会提出本标准的标准建议书和标准草案。同时开始查阅文献，收集国际、国家

和行业的标准、规范和专著，联络合作单位和具体起草成员。

（2）立项阶段

2024年4月25日，根据国标委发[2024]18号文件，《在微孔板中使用荧光

底物测定土壤酶活性》获得批准成为2024年第二批推荐性国家标准计划项目，

计划编Z-326，由中国科学院南京土壤研究所等单位承担起草工作。

（3）起草阶段

2024年6月20日，全国土壤质量标准化技术委员会与标准起草单位签订

《国家标准制修订计划项目任务书》，成立标准起草工作组，开始工作组讨论稿

和编制说明的编写工作。2024年6至12月根据收集的资料修改和完善预研阶段

的标准草案，形成工作组讨论稿初稿。

2024年1月至2021年4月，标准编制组根据讨论意见，形成了标准文本和

征求意见稿编制说明初稿。2024年4月30日，形成修改完善的标准征求意见稿

和征求意见稿编制说明提交全国土壤质量标准化技术委员会。本标准与ISO

22939:2019（E）文本结构和技术内容相同，仅最小限度的编辑性改动，包括小数

点形式的变化（,变为.）变化后的数据意义更为明确，更有利于标准的实际应用。

二、国家标准编制原则、主要内容及其确定依据，修订国家标准时，还包括修订

前后技术内容的对比

1.标准制定的基本原则