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呕吐毒素(DON)的检测ELISA法

测试前请仔细阅读本说明

在2—8℃冷藏—不要冻结

1.简介DON毒素

脱氧瓜萎镰菌醇（DON，）是单端孢菌素烯烃中的一种，

它通常是由生长在谷类物品（如小麦、玉米、大麦和秣草）

霉菌镰红菌素生成的。脱氧瓜萎镰菌醇的毒性效应包括：呕

吐、不想进食、胃肠炎、腹泻、免疫抑制和血液病。

研究表明猪对脱氧瓜萎镰菌醇很敏感。当脱氧瓜萎镰菌

醇含量≥1ppm时，它们就拒绝进食。其毒性也会对其他物种

产生毒性效应，各种物种对脱氧瓜萎镰菌醇的敏感性各不相

同。研究表明脱氧瓜萎镰菌醇会使已加工食物发生问题，包

括使可吃的谷类制品产生臭味、对生面团质量产生负面影

响。因此，精确测定可能含有脱氧瓜萎镰菌醇的食物和食品

就现得十分重要。FDA（美国食品和药品管理局）已经制定

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了脱氧瓜萎镰菌醇含量的强制标准。

美国食品药物管理局已经颁布的DON毒素建议限量如下：

适用对象限量物质

人1ppm麦制品(面粉、麸和胚

芽)

反刍动物牛肉10ppm在50%的食入所有谷物及其副产品

饲养的牛和鸡量

(全食入量时为5ppm)

猪5ppm在20%的食入量所有谷物及其副产品

(全食入量时为1ppm)

所有其它动物5ppm在40%的食入量所有谷物及其副产品

(全食入量时为2ppm)

2.方法原理

本测试盒的测试原理是一种竞争性的直接酶联免疫吸附

剂测试方法（ELISA），可准确检测出样品中ppm级的DON毒

素。样品和标准控制液中游离的DON毒素与轭合物中的DON

毒素竞争抗体结合位置。清洗后，加入底物，底物与轭合物

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反应出现兰色，兰色越深表明DON毒素越少。将其置于微型

孔阅读器中可读出透光度，以控制标准液的透光度作标准曲

线，将样品的透光度与标准曲线比较计算出样品中DON毒素

的准确浓度。

3.贮存要求

本试剂盒存放在2～8℃时，可以一直使用到标签上注明

的到期日期。

4.试剂与仪器

4.1已提供的材料

48个包被了抗体的孔；48个红色标记的混合孔；5瓶2ml

浓度为0、0.25、0.5、1、3ppmDON毒素控制标准液(黄色

标签)；1瓶DON毒素-HRP轭合物溶液(兰色标签)；1瓶24ml

底物溶液(绿色标签)；1瓶32ml红色终止液（红色标签）

4.2需要但未提供的材料

提取材料；蒸馏水或去离子水；100ml量筒；150ml的

具塞三角瓶；滤纸；样品收集具塞试管；漏斗；粉碎机；称

量为5～25克的秤；带450nm滤光片的酶标仪；200μl