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生理学实验报告范文
实验一坐骨神经-腓肠肌标本制备
[1]实验目的
1.学习机能学实验基本的组织分离技术;
2.学习和掌握制备蛙类坐骨神经-腓肠肌标本的方法;3.了解刺激的
种类。[2]实验原理
蛙类的一些基本生命活动和生理功能与恒温动物相似,若将蛙的神经
-肌肉标本放在任氏液中,其兴奋性在几个小时内可保持不变。若给神经
或肌肉一次适宜刺激,可在神经和肌肉上产生一个动作电位,肉眼可看到
肌肉收缩和舒张一次,表明神经和肌肉产生了一次兴奋。在机能学实验中
常利用蛙的坐骨神经-腓肠肌标本研究神经、肌肉的兴奋、兴奋性,刺激
与反应的规律和肌肉收缩的特征等,制备坐骨神经腓肠肌标本是机能学实
验的一项基本操作技术。[3]实验对象
蛙[4]实验药品
任氏液[5]仪器与器械
普通剪刀、手术剪、眼科镊(或尖头无齿镊)、金属探针(解剖针)、
玻璃分针、蛙板(或玻璃板)、蛙钉、细线、培养皿、滴管、电子刺激器。
[6]实验方法与步骤
①破坏脑、脊髓
取蛙一只,用自来水冲洗干净(勿用手搓)。左手握住蛙,使其背部
向上,用大拇指或食指使头前俯(以头颅后缘稍稍拱起为宜)。右手持探针
由头颅后缘的枕骨大孔处垂直刺入椎管(图3-1-1)。然后将探针改向前
刺入颅腔内,左右搅动探针2~3次,捣毁脑组织。如果探针在颅腔内,
应有碰及颅底骨的感觉。
再将探针退回至枕骨大孔,使针尖转向尾端,捻动探针使其刺入椎管,
捣毁脊髓。此时应注意将脊柱保持平直。针进入椎管的感觉是,进针时有
一定的阻力,而且随着进针蛙出现下肢僵直或尿失禁现象。若脑和脊髓破
坏完全,蛙下颌呼吸运动消失,四肢完全松软,失去一切反射活动。此时
可将探针反向捻动,退出椎管。如蛙仍有反射活动,表示脑和脊髓破坏
不彻底,应重新破坏。
图2-1-1捣毁蟾蜍脊髓
②剪除躯干上部、皮肤及内脏
用左手捏住蛙的脊柱,右手持粗剪刀在前肢腋窝处连同皮肤、腹肌、
脊柱一并剪断(图3-1-2),然后左手握住蛙的后肢,紧靠脊柱两侧将腹
壁及内脏剪去(注意避开坐骨神经),并剪去肛门周围的皮肤,留下脊柱
和后肢(图2-1-3)。
图2-1-2横断脊柱图2-1-3剪除躯干上部及内脏
③剥皮
一只手捏住脊柱的断端(注意不要捏住脊柱两侧的神经),另一只手
捏住其皮肤的边缘,向下剥去全部后肢的皮肤(图2-1-4)。将标本放在
干净的任氏液中。将手及使用过的探针、剪刀全部冲洗干净。
图2-1-4剥去皮肤
④分离两腿
用镊子取出标本,左手捏住脊柱断端,使标本背面朝上,右手用粗剪
刀剪去突出的骶骨(也可不进行此步)。然后将脊柱腹侧向上,左手的两
个手指捏住脊柱断端的横突,另一手指将两后肢担起,形成一个平面。此
时用粗剪刀沿正中线将脊柱盆骨分为两半(注意勿伤坐骨神经)。将其中
一半后肢标本置于盛有任氏液中备用,另一半放在蛙板上进行下列操作。
⑤辩认蛙后肢的主要肌肉
蛙类的坐骨神经是由第7、8、9对脊神经从相对应的椎间孔穿出汇合
而成,行走于脊柱的两侧,到尾端(肛门处)绕过坐骨联合,到达后肢背
侧,行走于梨状肌下的股二头肌和半膜肌之间的坐骨神经沟内,到达膝关
节腘窝处有分支进入腓肠肌。
⑥游离坐骨神经和腓肠肌
用蛙钉或左手的两个手指将标本绷直、固定。先在腹腔面用玻璃分针
沿脊柱游离坐骨神经,然后在标本的背侧于股二头肌与半膜肌的肌肉缝内
将坐骨神经与周边的结缔组织分离直到腘窝,但不要伤及神经,其分支待
以后用手术剪剪断。同样用玻璃分针将腓肠肌与其下的结缔组织分离并在
其跟腱处穿线、结扎。
⑦剪去其它不用的组织,操作应从脊柱向小腿方向进行。(a)剪去多
余的脊柱和肌肉
将后肢标本腹面向上,将坐骨神经连同2~3节脊椎用粗剪刀从脊柱
上剪下来。再将标本背面向上,用镊子轻轻提起脊椎,自上而下剪去支配
腓肠肌以外的神经分支,直至腘窝(图3-1-5A),并搭放在腓肠肌上。
沿膝关节剪去股骨周围的肌肉,并将股骨刮净,用粗剪刀剪去股骨上端的
1/3(保留2/3),制成坐骨神经-小腿的标本。(b)完成坐骨神经腓肠肌
标本
将脊椎和坐骨神经从腓肠肌上取下,提起腓肠肌的结扎线剪断跟腱。
用粗剪剪去膝关节以下部位,便制成了坐骨神经-腓肠肌标本(图3-1-
5B)。⑧检
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