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Q/CVMAXXXXX—2024
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犬巴贝斯虫病诊断技术
1范围
本文件规定了犬巴贝斯虫的临床诊断、显微镜检测、核酸检测和抗体检测的技术要求，描述了病原学和血清学的检测方法和诊断技术要求。
本文件适用于犬巴贝斯虫病的临床诊断、实验室诊断、流行病学调查以及检验检疫。其他动物巴贝斯虫病的诊断亦可以参照本方法。
注：本文件所称犬巴贝斯虫病为吉氏巴贝斯虫感染引起的犬巴贝斯虫病。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB19489实验室生物安全通用要求
GB/T27401实验室质量控制规范动物检疫
3术语和定义
3.1犬巴贝斯虫病Caninebabesiosis
由吉氏巴贝斯虫寄生于犬的红细胞引起的发热性蜱传性疾病，以高热、贫血、黄疸和血红蛋白尿为主要特征。
3.2吉氏巴贝斯虫Babesiagibsoni
吉氏巴贝斯虫属于原生生物，为顶复门、孢子虫纲、梨形虫目、巴贝斯科、巴贝虫属的一类寄生于犬红细胞内的血液原虫，属小型虫体，大小为1-2μm，在体内可呈点状、环状、梨籽形。
注1：吉氏巴贝斯虫是感染犬的巴贝斯虫之一。
注2：体内培养的吉氏巴贝斯虫典型形态见附录E中图E.1。
4缩略语
下列缩略语适用于本文件。bp：碱基对（BasePair）
dNTP：脱氧核糖核苷三磷酸（Deoxyribonucleosidetriphosphate）DTT：二硫苏糖醇（1,4-Dithiothreitol）
DNA：脱氧核糖核酸（Deoxyribonucleicacid）
IPTG：异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷（Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside）PCR：聚合酶链式反应（Polymerasechainreaction）
TAE：三羟甲基氨基甲烷-乙酸-乙二胺四乙酸（Tris-acetate-EDTA）
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5临床诊断
5.1流行病学
国内犬的巴贝斯虫病临床病例中以吉氏巴贝斯虫最为常见，日本、泰国及中国台湾的相关流行病学调查显示临床巴贝斯虫病例中约75％-85％为吉氏巴贝斯虫。1985年我国南京发现首例犬感染巴贝斯虫的病例，随后的调查显示我国大部分地区包括华东、华南、华中、华北甚至是东北地区和西北地区都有犬巴贝斯虫感染的病例报道，且部分地区发病率较高。犬巴贝斯虫病的发生与动物的性别和年龄相关性不大，而与犬接触蜱的机会有关。户外运动会增加感染巴贝斯虫的风险，此外脾脏受损或切除犬的免疫力和抵抗力降低也能够导致感染巴贝斯虫的几率升高。春夏秋季节温度适宜，环境潮湿导致蜱活动增加，犬在湿润的草地、山地或湿地上玩耍时更容易被蜱叮咬，引起巴贝斯虫感染。犬巴贝斯虫自然传播主要是通过蜱的叮咬传播，患病犬的发病大多数情况下与蜱有着直接的联系，也有研究证明通过输血、受污染的设备或经胎盘传播，以及犬只互相撕咬期间咬伤，唾液或摄入的血液直接在犬与犬之间水平传播。
5.2典型临床症状
5.2.1发热：体温升高至40-41℃,持续3-5天后，转至正常，5-7天后再次升高。即呈不规则间歇热型。
5.2.2贫血：渐进性贫血，可视黏膜苍白至黄染（见附录C图C.1中①②)。
5.2.3血红蛋白尿：尿液颜色深黄色或桔红色或似浓茶水样（见图C.1中④)。
5.2.4部分病犬有呕吐症状。
5.2.5感染吉氏巴贝斯虫时，某些患病犬体表可以检查到硬蜱。
5.3典型病理变化
5.3.1血液稀薄如水，凝固不良。
5.3.2全身皮下脂肪黄染。
5.3.3肝脏和脾脏肿大易碎，约为正常犬的2-3倍，甚至3-4倍（见图C.1中③)。
5.3.4单侧或双侧肾肿大。
5.4流行特点
5.4.1患病犬有蜱叮咬史，该病主要发生在长角血蜱（见附录D中图D.1）和镰形扇头蜱（见附录D中图D.2）分布的区域。
5.4.2多发于4-10月，分布和发病季节往往与蜱的分布和活动季节密切相关。蜱多在春季开始出现，寒冷季节较少。
5.5结果判定
犬出现5.2临床症状或者剖检时有5.3病理变化，并符合5.1流行特点，判为疑似吉氏巴贝斯虫病。
6血涂片显微镜镜检
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6.1基本要求
除特殊说明外，本文件所有操作程序均应符合GB19489和GB/T
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