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抗肿瘤转移机制的实验方法学研究进展--第1页
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抗肿瘤转移机制的实验方法学研究进展
肿瘤转移是是恶性肿瘤的一个重要表现,是指肿瘤细胞从原发部位侵入血
管、淋巴管或体腔,在新的部位由于血管生成而继续生长,从而形成与原发瘤相
同类型肿瘤的过程。主要经淋巴管、血道转移,它的出现往往标志着预后不良,大
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多数的癌症患者死亡与肿瘤转移密切相关。肿瘤转移是一个多阶段的复杂过程,
大体归纳如下:即机体内原发部位的肿瘤细胞在生长过程中细胞内部的骨架发生
重排、变形,从而脱落侵入细胞外基质(ECM),酶解ECM进入循环系统,在
循环系统释放的血管生成因子与内皮细胞特异性受体结合后,生成新的血管,瘤
细胞在血管构建的“骨架”上增殖,形成一个新的癌巢,再脱离出循环系统,在机
体某个点定居下来,并逐渐增殖成长为一个新的肿瘤瘤块的一系列过程。如果肿
瘤细胞反复转移,后果则相当的严重。这是目前肿瘤难治的一个主要原因,所以
研究抗肿瘤药物抗肿瘤转移的机制,从而筛选、开发出新的能促进机体抗肿瘤转
移的药物是非常重要的。
抗肿瘤转移机制的药理实验方法主要涉及到以下几个方面:
1.建立肿瘤转移的动物模型
一般以大鼠、裸鼠为常用动物模型。将目标瘤细胞如SGC-7901胃癌细胞株、
S180肝癌细胞株等置于含10%小牛血清的RPMI-1640培养基中,培养箱条件为3
7℃,5%CO进行细胞培养,0.1%胰酶消化传代后制备细胞悬液,之后将细胞悬
2
[2]
液以皮下注射或腹腔注射的方式,将肿瘤移植入动物体内。黄挺等人采用皮下
3]
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接种W256癌肉瘤的方法建立了Wistar大鼠的肝癌转移模型;魏锦来通过腋
下接种SGC-7901细胞悬液的方式建立了裸鼠的胃癌原位移植瘤动物模型。此外
还有尾静脉注射、裸鼠脑部右尾状核注射人肿瘤组织制备的细胞悬液等方式接
种。现阶段裸鼠的应用对于肿瘤方面的研究更有意义,因为裸鼠体表无毛,其先
天性缺乏T淋巴细胞,免疫功能低于别的实验动物,更容易进行异种肿瘤的移植。
而大鼠由于价格相对便宜而应用较为广泛。此外也可用C57BL/6小鼠等动物建
立动物模型。均应在无菌条件下进行造模,以免细菌等微生物产生污染。
2.观察转移情况
肿瘤转移的动物模型建立以后,需对动物进行分组实验研究。一般分为空白
对照组、药物组、阳性药对照组等。薛晓红等人在进行乳宁冲剂及其拆方对裸鼠
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移植瘤肺转移的抑制作用及机制时,将裸鼠分为6组,每组8只,7周后处死裸鼠,
取出原发部位肿瘤和肺,分别称重、检测原发部位肿瘤体积和肺部肿瘤转移情况。
观察转移情况的方法是:将组织块固定于含有甲醛的固定液中24小时,电子显微
镜观察组织表面灰白色结节的数目,即
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