布鲁氏菌病检测和防治方法研究.pdfVIP

布鲁氏菌是一类革兰氏阴性的短小杆菌，家畜中猪、羊、牛对其最易感，可引起母

畜传染性流产。人类主要通过接触带菌动物或食用病畜及其相关乳制品而造成感染，布

鲁氏菌病(以下简称布病)是世界范围内严重危害公共卫生安全的人兽共患传染病之一。

目前世界上有170多个国家和地区存在布病流行，每年约有50万的病例，因布病造成

的经济损失高达约30亿美元。近年来，我国家畜养殖量逐年上升，布病的流行范围逐

步扩大，对我国家畜养殖业和人类健康形成较大威胁。本文结合2006-2017年我国《兽

医公报》公布的畜间布病疫情数据，对我国布病流行现状和研究进展展开讨论，分析布

病流行趋势，以期为及时调整布病防控政策，掌握布病分布特征提供参考。

由于布病危害较大，因此感染早期的快速诊断及鉴定对于降低损失意义重大。目前，

临床上的布鲁氏菌检测主要是病原分离，但该方法耗时耗力，且不能做到早期迅速诊断。

近几年，随着分子生物学的迅速发展，特别是生物信息学、微生物基因组学的发展，以

多重PCR、荧光定量PCR检测方法和基因检测技术为主的布病检测技术，以其操作简单

迅速、高效稳定、易于操作等众多优点，成为近些年疫病检测的研究热点。此外，各类

疫苗的研制以及临床中西药物的联合使用，更为布病的有效防控开辟了新的途径。

1、流行状况

我国畜间布病基本经历了20世纪50--70年代的流行期、80--90年代的基本控制期

以及2000年以后的反弹上升期、2010年以后的流行期4个阶段。目前，我国动物布病

发病数量较多的省份有内蒙古、新疆、陕西、黑龙江和山西等，其中以内蒙古最为严重。

2011年，内蒙古的动物布病发病数达到117623例，占全国动物发病总数的94.08%，

是我国布病流行最为严重的地区，防控形势十分严峻。

从2006-2017年农业部《兽医公报》公布的相关数据(表1)可知，2011年我国畜间

病例数达到了高峰，发病动物数量超过10万头(只)。2012年后，无论人间还是畜间，

虽然患病省份数量仍维持在较高水平，但畜间病例数呈现下降趋势。

2、布病检测技术

2.1细菌学检测

细菌学方法常用于实验室检测中，动物布病病原体可从流产胎儿、胎衣、奶样和血

液中分离，人布病病原体可从血液、骨髓、尿液中分离。不同种属的布鲁氏菌生长状况

存在差异，如牛型布鲁氏菌初分离时生长十分缓慢，且对环境要求较为严苛，需有适量

的二氧化碳环境，因此鉴定时间较长，一般2--4周无菌生长，才可判定为阴性。也有报

告称，采用BACTEC9240血培养系统以及骨髓培养可提高布鲁氏菌生长速率，缩短检出

时间，但总体来说这种病原分离技术费时费力，且检测的准确性不高。

2.2免疫学检测

2.2.1血清凝集试验常见的血清凝集试验有虎红平板凝集试验(RBT)和试管凝集试

验(SAT)，但二者的特异性和灵敏度都不高，同时也存在人为判定因素影响，在实际操作

中应用不方便，因而国际贸易中不主张使用SAT试验。范伟兴等在布鲁氏菌检测试验中

证实，不论RBT还是SAT均有较高的假阳性和假阴性，因此可以先选择RBT进行初筛，

若为阳性，再用cELISA进行确诊。杨春萍用RBT和SAT比较布病检测的阳性率、敏感性

及特异性，结果表明在布病的临床诊断中，使用RBT,SAT进行检测均存在一定的局限

性。总之，在实际应用中，应综合采用多种检测方法对布病进行鉴定，这样才能提高诊

断的准确性。

2.2.2酶联免疫吸附试验(ELISA)ELISA方法是国际贸易中指定的诊断方法，其特

点是快速、特异、灵敏，因而不断得到推广应用。该方法的灵敏性比凝集试验高，特异

性也很好，既可检测IgG和IgM，又可检测IgA类抗体。1976年第一次使用间接ELISA

法检测人布病。随着生物技术的高速发展，现如今牛、羊和猪等多种动物的布病iELISA

方法也已经被建立。该方法是利用抗原抗体之间的专一性，对抗体进行检测，可分为:

双抗夹心法，多用于大分子抗原检测;间接法，常用于抗体检测;竞争法，常用于小分子

抗原检测。

对竞争法和间接法进行了比较分析，证明cELISA在实际操作中，能区分疫苗免疫抗

体与病株感染抗体，且特异性、灵敏度都较高。我国学者杜锐等对3种抗原进行筛选和

优化，确定了其中之一的超声波破碎抗原为最佳的抗原，第一次建立了检测鹿布鲁氏菌

抗体的间接ELISA;2003年