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第七章免疫技术
1免疫技术类型主要包括:RIA和IRMA。
2免疫性核素的量单位有:性活度、性比活度和性浓度。
3性核素选择原则是:高比活度、适宜半衰期、对抗原或抗体没有损害、容易标记。
4性标记物时,常用的标记方法有:直接法和间接法。
5性标记物纯化常用的方法有:葡聚糖凝胶过滤法、薄层层析法、纸层析法、电泳法和
高效液相层析法。
6免疫技术试剂盒主要组成试剂有:性标记物、抗体、B/F分离剂。
7RIA的基本操作可分为:抗原抗体分离、B/F分离、性强度测定、数据处理四个步骤。
8和射线探测仪器由射线探测器和后续电子学单元两部分组成
9根据加样顺序的不同,RIA分为平衡法和顺序饱和法两个类型。
10IRMA主要有单位点法和双位点法两种类型。
11RIA的优点有敏感度高、特异性强、准确性好,缺点有污染和试剂有效期短。
第八章荧光免疫技术
1荧光免疫技术的主要类型包括荧光抗体染色技术和荧光免疫测定技术。
2荧光物质有荧光素和其他荧光素物质(镧系稀土元素)
3荧光抗体染色技术可分为荧光免疫显微技术和流式荧光免疫技术。
4镧系稀土元素标记物的螯合剂有多羧基酸类螯合剂、β—二类螯合剂、BCPDA
和10菲洛林。
5荧光免疫测定根据抗原抗体反应后是否需要分离而分为均相免疫和非均相免疫两种类型。
6非均相荧光免疫测定法包括:时间分辨荧光免疫测定和荧光酶免疫测定。
7均相荧光免疫测定法包括:荧光偏振免疫测定和底物标记荧光免疫测定。
8荧光素标记抗体的方法有:搅拌标记法和透析标记法。
第九章酶免疫技术
1膜载体酶免疫测定技术的类型主要有:斑点—ELISA、免疫渗滤试验、免疫层析试验、免
疫印迹法。
2免疫印迹法是由SDS—PAGE、蛋白质转印和酶免疫测定三项技术结合而成。
3酶免疫组织化学技术常用的酶有:HRP、AP和GOD。
4ELISA方法类型主要有双抗体夹心法、间接法、竞争法和捕获法。
5ELISA中三种必要的试剂是:固相的抗原或抗体、酶标记的抗原或抗体、酶的反应底物。
6酶结合物常用的方法为戊二醛交联法和过碘酸盐氧化法。
7在稀释液和洗涤液中加入吐温—20,可以去除非特异性吸附。
8均相酶免疫测定技术的类型主要有酶增强免疫测定技术和克隆酶供体免疫分析技术。
9非标记抗体酶免疫组织化学技术的类型主要有:酶桥法、PAP法、双桥PAP法、APAAP
法。
第十章化学发光免疫技术
1化学发光免疫技术根据发光方式的不同分为化学发光酶免疫分析、化学发光免疫分析和电
化学免疫分析。
2根据形成激发态分子的激发能可将发光分为三种类型:光照发光、生物发光、化学发光,
发光剂分为荧光素、生物发光剂、化学发光剂。
3HRP常用的发光底物为ALP常用的发光底物为AMPPD和4—MUP。
4发光酶免疫分析的技术要点包括抗原抗体反应、标记物游离部分和结合部分分离、酶促发
光反应及检测。
5发光酶免疫分析常用的标记酶有HRP和ALP,根据酶促反应底物不同,发光酶免疫分析
可分为荧光酶免疫分析、化学发光酶免疫分析。
6电化学发光免疫分析是电化学发光和免疫测定相结合的产物。它的标记物的发光原理与一
般化学发光不同,是一种在电极表面由电化学的特异性化学发光反应,实际上包括了电
化学和化学发光两个过程。ECL通过电启动化学发光反应,而CL是通过化合物混合启动发
光反应
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