生物课件第八章-微生物的遗传变异和育种-第二节-基因突变和诱变育种.ppt

微生物学;第二节基因突变和诱变育种;基因突变

诱变育种;一、基因突变（genemutation）;从自然界分离到的菌株，简称野生型。;（一）突变类型;表型;link1;突变率;;突变一般是独立发生的。;（三）基因突变的特点;（2）非对应性;某基因的突变率不受它种基因突变率的影响。;基因突变后的新遗传性状是稳定的、可遗传的。;（四）基因突变自发性和不对应性

的实验证明;证明突变的性状与引起突变的原因间无直接对应关系！;1.变量试验（fluctuationtest）;2.涂布试验（Newcombeexperiment）;3.平板影印培养试验（replicaplating）;影印的作用是保证这3个平板上所长出的菌落的亲缘和相对位置保持严格的对应性。;JoshuaLederberg;（五）基因突变极其机制;诱发突变简称诱变，是指通过人为的方法，利用物理、化学或生物因素显著提高基因自发突变频率的手段。;(1)碱基的置换（substitution）;碱基的置换;;置换的机制;各种烷化剂（alkylatingagent）等;;它们可与一个或几个碱基发生生化反应，

引起DNA复制时发生转换，

能引起颠换的诱变剂很少。;②间接引起置换的诱变剂;它们的作用是通过活细胞的代谢活动掺入到DNA分子中

后而引起的，故是间接的。;(2)移码突变（frame-shiftmutation，phase-shiftmutation）;由移码突变所产生的突变株，称为移码突变株（frame-shiftmutant）。;能引起移码突变的有效诱变剂——吖啶类染料;由吖啶类化合物诱发的移码突变及其回复突变图示：

（双线部分代表正常密码子，单线部分表示不正常）;③在第二个密码子上缺失一个碱基A后引起的变化：;⑥如缺失三个碱基，也只引起一段密码子不正常：;吖啶类化合物引起移码突变的机制：;(3)染色体畸变（chromosomalaberration）;DNA的大损伤（macrolesion）;DNA序列通过非同源重组的方式，

从染色体某一部位转移到

同一染色体上另一部位

或其他染色体上某一部位的现象，

称为转座（transposition）。;凡具有转座作用的一段DNA序列，称转座因子

（transposibleelement，TE），又称跳跃基因

（jumpinggene）、可移动基因（moveablegene）、

可移动遗传因子（mobilegeneticelement）。;转座因子;进化研究

抗药性产生机制

各种研究用的突变株的获得;转座因子的特点;2.自发突变（spontaneousmutation）;自发突变的原因;（六）紫外线对DNA的损伤及其修复;;把经UV照射后的微生物立即暴露于可见光下时，可明显降低其死亡率的现象，称为光复活作用。;最明显的是在E.coli的实验

①对照：8×106个／mLE.coli→100个／mLE.coli

②试验：8×106个／mLE.coli→－－－－→2×106个／mLE.coli;使二聚体（dimer）重新分解成单体（monomer）;在一般的微生物中都存在光复活作用，在利用UV进行诱变育种等工作时，应在红光下进行照射和后续操作，并放置在黑暗条件下培养。;2.切除作用（excisionrepair）;酶切;二、突变与育种

（一）自发突变与育种

（breedingbyspontaneousmutation）

1.从生产中育种;2.定向培育优良菌株;（二）诱变育种（breedingbyinducedmutation）;筛选;可获得供工业和实验室应用的各种菌株；

提高有用代谢产物的产量；

减少杂质、提高产品质量、扩大品种和简化工艺等。;诱变育种的特点;1.诱变育种的基本环节;出发菌株;2.诱变育种中的原则

（1）选择简便有效的诱变剂;烷化剂可与巯基、氨基和羧基等直接发生反应，更易引起基因突变。;拟辐射物质;出发菌株（originalstrain）是指用于育种的原始菌株，选用合适的出发菌株有利于提高育种的效率。;合适的出发菌株来源：

①由自然界直接分离获得的野生型菌株；

②在生产中经历生产条件考验的菌株；

③已经过诱变甚至多次改造的菌株；

④选用对诱变剂敏感性较高增变变异株；等等。;在诱变育种中，所处理的细胞必须是单细胞、均匀的悬液状态。;诱变剂一般只作用于DNA双链中的某一条单链，故某一突变还是无法反映在当代的表型上。只有当经过DNA的复制和细胞分裂后，这一变异才会在表型上表达出来，于是出现了不纯菌落，这就叫表型延迟（phenotyp