河南农业大学考研专业课《现代分子生物学》考试试卷(61) .pdfVIP

河南农业大学考研专业课《现代分子生物学》考试试卷(61) .pdf

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河南农业大学考研专业课《现代分子生物

学》

课程试卷(含答案)

__________学年第___学期考试类型:(闭卷)考试

考试时间:90分钟年级专业_____________

学号_____________姓名_____________

1、分析题(5分,每题5分)

1.写出从组织中抽取RNA的关键步骤,并解释如何判断RNA质量。

答案:(1)从组织中提取RNA的步骤如下:

①将组织在液氮中磨碎,每50~100mg组织加入1mlTRIzol

裂解液溶解样品,充分吹打混匀。

②每1mlTRIzol加入2.0ml氯仿,剧烈震荡15s,室温放置

5min。

③4℃,10000g离心15min,此时RNA主要开始集中在水相中。

④将水相转移至新的重新分配离心管中,加入等体积异丙醇,室

温放置10min。

⑤4℃,10000g离心10min,此时可在离心管顶端观察到白色

观察沉淀,即为RNA。

⑥用75冷的乙醇洗涤沉淀,4℃,7500g以下,离心5min,弃

上清。

⑦超净台中吹干,加入无RNase的水溶解。

(2)检测RNA质量的方法如下:

①凝胶成像:取适量RNA溶液加入电泳缓冲液后,跑琼脂糖凝胶

电泳,如果28S和18S条带明亮、清晰,并且28S的亮度在18S条

带的两倍以上,则认为RNA的质量是好的。

②吸光度检测:使用紫外分光光度计筛查RNA样品在260nm、

280nm处的吸光度,若两者的比值在1.8~2.0时,可认为RNA纯

度良好,蛋白质等肝细胞其他生物体的污染可以接受。

解析:

2、判断题(55分,每题5分)

1.限制性内切核酸酶具有极高的专一性,可以识别蛋白质或多肽链

上的特定位点,将其切断,形成黏性末端或平端。()

答案:错误

解析:限制性内切核酸酶具有极高的专一性,可以识别DNA双链的特

定位点,将其切断,形成黏性末端或平端。

2.紫外线引起DNA损伤的结果是导致胸腺嘧啶二聚体的形成。

()[扬州大学2019研]

答案:正确

解析:紫外线照射后DNA,发现有几个变化,其中的明显的变化是同

一链上的两个邻接嘧啶核苷酸最共价联结,形成嘧啶二聚体。

3.根据某一感兴趣蛋白质的序列、抗原性以及配基结合性质制备探

针,可从DNA文库筛选到相应的基因。()

答案:错误

解析:筛选DNA文库的探针应该是根据DNA序列制备的,而不是蛋

白质。

4.碱基的替换有两类即转换(transition)和颠换

(transversion),A被T替换是转换,而C被G替换则是颠换。

()

答案:错误

解析:碱基的替换有两类即转换(transition)和颠换

(transversion),同类碱基替换是转换,而嘌呤被嘧啶移除则是颠换。

5.当细菌DNA受到紫外光照射时,细菌细胞内会启动一个被称为

SOS的诱导型DNA修复系统。参与SOSDNA修复系统的许多基因都同时

受RecA阻遏蛋白的抑制。()

答案:错误

解析:当细菌DNA受到紫外光照射时,细菌细胞内会启动一个被称为

SOS的诱导型DNA修复

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