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白血病/淋巴瘤免疫分型

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流式细胞术的基本概念流式细胞术（FlowCytometry,简称FCM）是一种可以快速、准确、客观，并且同时检测单个微粒（通常是细胞）的多项特性的技术，同时可以对特定群体加以分选研究对象为生物颗粒，如各种细胞、微生物及人工合成微球等研究的微粒特性包括多种物理及生物学特征，并加以定量2

散射光信号和荧光信号前向角散射光（FSC,ForwardScatter） 入射激光的前向散射光信号 细胞相对大小及其表面积侧向角散射光（SSC,SideScatter） 入射激光90?角的散射光信号 细胞粒度及细胞内相对复杂性荧光素与特异抗体结合，荧光抗体与细胞抗原结合越多，产生的荧光信号越强。3

CD45/SS示意图4

实验对照的设计空白对照：ALL阴性对照：常用同型抗体对照单色分析：设同型抗体对照多色分析：同型对照，单阳性对照（用于仪器校正）阳性对照：检测阴性时5

空白对照和阴性对照的比较：6

CD3CD8需要用多少的标志来确证感兴趣的细胞群?它们在细胞上的分布是不是很近?它们是否在不同的细胞上表达不同?他们表达强还是弱?抗原表达

CD3CD4CD3CD87

抗原分布

表面,胞浆,核内是共同检测还是分别检测?表面胞浆核内CD3,CD4,CD8,tetramercytokinesDNACD3,4,8,tetramer+CytokinesCD3,4,8,tetramer+DNACytokines+DNACD3,4,8,tetramer+Cytokines+DNA8

设门08-033079

设门全部细胞门内细胞08-0330710

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血液肿瘤分类进程13

目前最完善的血液肿瘤免疫分型文献14

白血病免疫分型的理论基础白血病/淋巴瘤免疫分型采用的抗原标志是表达于正常造血细胞不同分化发育阶段的分化抗原。虽然是恶性肿瘤细胞，但仍能表达正常血细胞所具有的抗原，因而仍可依据其抗原的表达谱对白血病/淋巴瘤进行免疫分型。为了正确分析白血病/淋巴瘤细胞，必须对正常造血细胞分化抗原的表达模式有充分的了解。只有熟悉正常细胞的抗原表达模式，才能辨认白血病/淋巴瘤细胞的存在。15

细胞类型鉴定Borowitzetal(1993)AJCP100:534-40.Steltzeretal(1993)AnnNYAcadSci667:265-28016

CD45/SS示意图正常骨髓细胞血液肿瘤细胞老化粒细胞、噬酸细胞早幼—成熟粒细胞M3、CML单核细胞M4、M5LGL淋巴细胞CLL、ALL、CLD正常前体细胞M0、M1、M2、嗜碱性粒细胞M4、M5、ALL成熟红细胞、血小板M6、M7、MM细胞碎片Pre-B-ALL非血液来源细胞17

B淋巴细胞分化与抗原表达关系图WoodandBorowitz(2006)Henry’sLaboratoryMedicine18

T淋巴细胞分化与抗原表达关系图WoodandBorowitz(2006)Henry’sLaboratoryMedicine19

粒细胞分化与抗原表达关系图WoodandBorowitz(2006)Henry’sLaboratoryMedicine20

单核细胞分化与抗原表达关系图WoodandBorowitz(2006)Henry’sLaboratoryMedicine21

非肿瘤T淋巴细胞表型22

非肿瘤B淋巴细胞表型23

非肿瘤粒细胞、单核细胞表型24

非肿瘤粒细胞、单核细胞表型25

白血病免疫分型根据白血病细胞表达的系列相关抗原，确定其系列来源。如：淋系T/B、粒单系、红系、巨核系等。根据白血病细胞表达的系列分化其相关抗原进一步分型。如：早前B，前B，普通B…26

EGIL，1998年白血病积分系统分值B系T系髓系2CD79a