紫外可见分光光度法基本原理.ppt

****关于紫外可见分光光度法基本原理一、概述光谱分析法是指在光（或其它能量）的作用下，通过测量物质产生的发射光、吸收光或散射光的波长和强度来进行分析的方法。吸收光谱(AbsorptionSpectrometry)发射光谱(EmissionSpectrometry)分子光谱(MolecularSpectrometry)原子光谱(AtomicSpectrometry)紫外—可见分光光度法是一种分子吸收光谱法。第2页,共30页，5月，星期六，2024年，5月概述:在光谱分析中，依据物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法称为吸光光度法,主要有:红外吸收光谱(InfraredAbsorptionSpectroscopy)：分子振动光谱，吸收光波长范围2.5?1000?m,主要用于有机化合物结构鉴定。紫外吸收光谱(UltravioletSpectrophotometry)：电子跃迁光谱，吸收光波长范围200?400nm（近紫外区），可用于结构鉴定和定量分析。可见吸收光谱(VisibleSpectrophotometry：电子跃迁光谱，吸收光波长范围400?750nm，主要用于有色物质的定量分析。本章主要讲授紫外可见吸收光谱法。第3页,共30页，5月，星期六，2024年，5月二、紫外可见吸收光谱1．光的基本性质光是一种电磁波，具有波粒二象性。光的波动性可用波长?、频率?、光速c、波数（cm-1）等参数来描述：??=c；波数=1/?=?/c光是由光子流组成，光子的能量：E=h?=hc/?（Planck常数：h=6.626×10-34J×S)光的波长越短（频率越高），其能量越大。白光(太阳光)：由各种单色光组成的复合光单色光：单波长的光(由具有相同能量的光子组成)可见光区：400-750nm紫外光区：近紫外区200-400nm远紫外区10-200nm（真空紫外区）第4页,共30页，5月，星期六，2024年，5月2.物质对光的选择性吸收及吸收曲线M+热M+荧光或磷光?E=E2-E1=h?量子化；选择性吸收;分子结构的复杂性使其对不同波长光的吸收程度不同；用不同波长的单色光照射，测吸光度—吸收曲线与最大吸收波长?max；M+h??M*光的互补：蓝??黄基态激发态E1（△E）E2第5页,共30页，5月，星期六，2024年，5月关于吸收曲线的讨论：（1）同一种物质对不同波长光的吸光度不同。吸光度最大处对应的波长称为最大吸收波长λmax（2）不同浓度的同一种物质，其吸收曲线形状相似λmax不变。而对于不同物质，它们的吸收曲线形状和λmax则不同。（动画）（3）吸收曲线可以提供物质的结构信息，并作为物质定性分析的依据之一。（4）不同浓度的同一种物质，在某一定波长下吸光度A有差异，在λmax处吸光度A的差异最大。此特性可作为物质定量分析的依据。（5）在λmax处吸光度随浓度变化的幅度最大，所以测定最灵敏。吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的重要依据。第6页,共30页，5月，星期六，2024年，5月3.紫外—可见分子吸收光谱与电子跃迁物质分子内部三种运动形式：（1）价电子相对于原子核的运动（2）原子核在其平衡位置附近的振动（3）分子本身绕其重心的转动分子具有三种不同能级：电子能级、振动能级和转动能级三种能级都是量子化的，且各自具有相应的能量分子的能量包括:电子能量Ee、振动能量Ev、转动能量Er即E＝Ee+Ev+Er第7页,共30页，5月，星期六，2024年，5月能级跃迁紫外-可见光谱属于电子跃迁光谱。电子能级间跃迁的同时总伴随有振动和转动能级间的跃迁。即电子光谱中总包含有振动能级和转