罗氏(ROCHE) DNA纯化操作说明- RM21610, RM20103.pdf

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Version:M16B01V2.0

DpnI

产品目录号:RK21109

产品组分

规格-1规格-2

组分名称组分编号

500U5,000U

DpnI(20,000U/mL)RM2161025μL250μL

10xBufferCutSRM201031.25mL1.25mL

产品说明

操作说明

识别位点

推荐的DpnI酶切反应体系(以50μL体系为例)

组分加入量

CH3

ddHOUpto50μL

2

5...GATC...310XBufferCutS5μL

3...CTAG...5DNA*1μg

DpnI**1μL

CH3

*注:DNA底物中应不含苯酚、氯仿、乙醇、EDTA、洗涤剂或高浓度盐,

活性定义否则将会影响DpnI酶活性。

**注:50μL反应体系中,0.5μLDpnI的酶可以完全酶切1μg的DNA

1活性单位(U)是指在50μL反应体系中,37°C1hr内完

底物,但一般推荐使用1μL。

全酶切1µgpBR322DNA(dam甲基化的)所需的酶量。

37°C孵育5-15min可以完全酶切DNA底物。

保存温度+

DpnI酶仅能识别甲基化的位点,从dam菌株中提取的

-20°C

DNA可以作为DpnI酶切底物。

酶切反应条件

1XBufferCutS,37°C反应

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