薄层色谱法介绍和其应用.pptVIP

薄层色谱法介绍和其应用;第一章概述

第二章薄层色谱法的分类和原理

第三章薄层色谱法实验方法及应用

第四章薄层色谱法在中草药方面的

应用

;第一章概述;薄层色谱法;薄层色谱法（ThinLayerchromatography，TLC）是20世纪50年代发展起来的一种平面色谱技术；至20世纪60年代后，对薄层色谱法在使用器材的规格、操作方法及术语使用的

标准化等方面进行了大量的工作，使该方法日趋成熟和完善。迄今几十年来，TLC已在医药、滥用毒品检测、农药、食品、化工、环保等多方面有了广泛的应用。;薄层色谱技术产生和发展可分为以下3个阶段：

起步阶段

推广普及阶段

发展提高阶段

;1938年N.A.Izmailor和M.S.Schraiber首次在显微镜载玻片上涂布的氧化铝薄层分离了多种植物酊剂中的成分，标志着薄层色谱法的诞生。

薄层色谱法具有设备简单、操作方便、分离速度快等优点，从而发展很快，并在中草药的定性定量分析中得到了广泛应用。

80年代以来，高效薄层板的出现以及薄层自动化仪器的使用，极大地提高了薄层分析结果的重现性和准确度。有的学者称之为现代薄层色谱技术（ModernTLC)或仪器化薄层色谱技术（Instrumentalplanarchromatography)。

;第二章薄层色谱法的分类和原理;吸附色谱：

吸附色谱是利用被分离物质在吸附剂上被吸附的能力不同，当用展开剂展开时，不同的物质因吸附和解吸附能力的不同而造成的迁移不同，从而达到分离的目的，是薄层色谱上最常用的方法。常用的吸附剂有硅胶、氧化铝、硅藻土等。;分配色谱:

分配色谱是利用被分离物质在两相中分配系数的不同使组分分离。常以硅胶、硅藻土、纤维素等作载

体，它们吸附一定量的水分或其它溶剂(如:缓冲液、

酸液、甲酰胺、丙二醇等)作固定相，再用与固定相不相混溶的展开剂展开,被分离物质在两相之间不断地进行分配,从而达到分离。

;离子交换色谱:

离子交换色谱是利用被分离物质在离子交换

树脂上交换能力的不同使组分分离。常用的有

离子交换纤维制成的薄层板，用于分离某些亲

水性强、能成离子态的物质。

;

凝胶色谱：

葡聚糖凝胶的分离原理是葡聚糖凝胶在吸水后形成凝胶粒子，在其交联的骨架中有许多一定大小的网眼。网眼大，大分子物质能进入网眼内；网眼小，只有小分子物质才能进入网眼；而超过一定限度的大分子物质，就被排阻在凝胶粒子的外部而不能进入网眼。如同按照分子大小过筛一样，所以称为分子筛。用于高分子的非离子化合物的分离，如蛋白质及核酸等。;其他薄层色谱

络合薄层色谱法AgNO3

微乳薄层色谱法以微乳液为流动相

胶束薄层色谱法应用一定浓度的表面活性剂溶液

所形成的胶束溶液作为流动相

反相薄层色谱法利用化学键合反应，将烃基硅烷键

合到硅胶表面，制成非极性固定

相，用极性较大的液体作流动相

手性固定相法光学活性的天然高分子－纤维素，

纤维素衍生物等

;第三章薄层色谱法实验方法及应用

;薄层色谱法

薄层固定相、薄层点样、薄层展

开、显色、记录;薄层固定相;薄层固定相;薄层固定相HPTLC与普通TLC的差别;薄层固定相HPTLC与普通TLC的差别;目前国内常用的薄层板：

青岛海洋化工厂(玻璃)

山东烟台(玻璃)

天津斯利达(铝箔)

快检板(铝箔);薄层固定相;薄层点样;薄层点样;薄层点样;薄层点样;薄层点样—点样环形色谱效应;薄层点样—喷雾点样原理;薄层点样—喷雾点样的优点;薄层点样;;薄层点样;展开;展开;展开;展开;展开;分离度（resolution，R）

定义式：R=2d/（W1+W2）=2L0（Rf2-Rf1）/（W1+W2）

相邻两峰分开的距离是平均峰宽[（W1+W2）/2]的几倍

基线分离：

基本分离：R＝

最佳分离：;显色;显色;显色;显色;常用显色剂及其使用方法

10%硫酸乙醇溶液为通用型显色剂。具有一定的腐蚀性。显色后置105℃下加热至斑点显色清晰，在可见光或紫外光365nm下检视。

10%三氯化铝乙醇溶液主要针对黄酮类成分显色。一般显色后置紫外光365nm下检视。

碘化铋钾试液主要针对生物碱类成分显色。