五味子乙素对人乳腺癌细胞MCF-7增殖和Notch-1信号通路的影响.pdfVIP

五味子乙素对人乳腺癌细胞MCF-7增殖和Notch-1信号通

路的影响

赵炜;赵志正

【期刊名称】《《中国中医药信息杂志》》

【年(卷),期】2019(026)010

【总页数】5页(P55-59)

【关键词】五味子乙素;细胞增殖;Notch-1;移植瘤;乳腺癌细胞MCF-7;小鼠

【作者】赵炜;赵志正

【作者单位】中国中医科学院广安门医院北京100053

【正文语种】中文

【中图分类】R285.5

乳腺癌是发生在女性中最常见肿瘤之一，是女性癌症相关死亡的主要原因[1]。

近年来，随着诊断学尤其是癌症分子生物学和基因组学领域的进步，乳腺癌检测发

生了革命性的变化[2]。目前，治疗乳腺癌主要方法包括外科手术、化疗、放疗，

大大改善了乳腺癌的预后，但仍有许多患者复发及在治疗过程中出现不良反应和耐

药。因此，寻找有效治疗乳腺癌的药物，成为当前研究的重点。五味子乙素

（SchisandrinB）是从五味子中分离得到的主要生物活性成分[3]。近年研究发现，

五味子乙素在多种疾病中介导多种生物活性，包括抗炎、抗氧化和心血管保护作用

[4-6]。有报道显示，五味子乙素可抑制胆管癌、肺腺癌、胶质瘤、胃癌细胞增殖

[7-10]，诱导细胞凋亡，减弱肿瘤的侵袭和转移[11]。本研究分别通过细胞与动物

实验，观察五味子乙素对人乳腺癌细胞增殖及Notch-1信号通路表达的影响，探

讨其可能的分子机制。

SPF级雌性Balb/C小鼠10只，6～8周，体质量18～20g，购自广东省医学

实验动物中心。饲养于温度（20±2）℃、相对湿度（50±5）%环境，日照时间

12h，自由摄食饮水。实验前小鼠适应性喂养7d。

五味子乙素，南京道斯夫生物科技有限公司，溶于二甲基亚砜并配制成100

mmol/L贮备液保存。

人乳腺癌细胞株MCF-7，中国科学院上海细胞库提供，在本实验室进行培养。

杜尔伯科改良伊格尔（DMEM）培养基、胰蛋白酶和胎牛血清，美国Gibco公

司；青/链霉素，美国Sigma公司；BCA法蛋白浓度检测试剂盒，上海碧云天生

物技术公司；抗Notch-1抗体、抗Hes-1抗体、抗Hey-1抗体、抗β-actin抗

体和辣根过氧化物标记的二抗，英国Abcam公司；CCK-8试剂盒，上海博谷生

物科技有限公司。超低温冰箱（日本Sanyo公司），CO2细胞培养箱（美国

Thermo公司），低速离心机（美国Thermo公司），电泳仪（北京六一生物科

技有限公司），凝胶成像仪（美国AzureBiosystems公司）。

MCF-7细胞培养于含10%胎牛血清的DMEM培养基，置于37℃、含

5%CO2且湿度完全饱和的恒温培养箱中培养，定期取对数生长期细胞进行传代。

用于检测细胞增殖并计算增殖抑制率。100μL对数生长期MCF-7细胞

（1×105/孔）接种于96孔板，每组设置4个复孔，共4组，加入终浓度为0、

20、40、80μmol/L五味子乙素，培养24、48、72h，每孔加入CCK-8试剂

10μL，继续培养4h，使用分光光度计检测波长450nm处吸光度，计算细胞增

殖抑制率。细胞增殖抑制率（%）＝（1－给药组A450÷对照组A450）×100%。

用PBS将对数期乳腺癌细胞MCF-7浓度调整为2×107/mL，取0.1mL悬液

注射于小鼠右后侧肢体皮下，接种后观察1周成瘤，将10只成瘤小鼠随机分为对

照组和五味子乙素组，每组5只。五味子乙素组小鼠腹腔注射五味子乙素，每2d

注射1次，直至细胞接种后32d，每次100mg/kg，体积0.2mL；对照组注射

等体积PBS。每4d用游标卡尺测量肿瘤长径和短径，肿瘤体积＝长径×短径2÷2。

细胞接种32d，处死裸鼠，称取瘤重，计算抑瘤率。抑瘤率（%）＝（对照组瘤

体平均质量－给药组瘤体平均质量）÷对照组瘤体平均质量×100%。肿瘤组织置

于液氮中保存备用。

MCF-7细胞用预冷的细胞裂解液裂解15min，4℃、12000