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结肠肿瘤前细胞系的建立及应用

曹海龙;许梦雀;鄢芳;王邦茂

【摘要】结肠肿瘤前细胞即永生化结肠上皮细胞系（IMCE），来源于Immorto

小鼠和腺瘤性结肠息肉病基因（Apc）min／＋小鼠杂交后子代小鼠的结肠上皮细

胞，其表型正常，可发生恶性转化，已成为肠道肿瘤发生发展相关研究较为理想的

细胞模型。此文主要就该细胞系的建立及其在肠道肿瘤发生机制和筛选防治药物等

领域中的应用进展作一综述。

【期刊名称】《国际消化病杂志》

【年(卷),期】2016(036)001

【总页数】4页(P31-33,53)

【关键词】结直肠癌;结肠肿瘤前细胞;腺瘤性结肠息肉病基因

【作者】曹海龙;许梦雀;鄢芳;王邦茂

【作者单位】300052天津医科大学总医院消化科;300052天津医科大学总医院消

化科;300052天津医科大学总医院消化科;300052天津医科大学总医院消化科

【正文语种】中文

·综述·

近年来，结直肠癌(CRC)的发病率明显增加。现有研究已发现与CRC发生密切相

关的一些重要的基因突变，如腺瘤性结肠息肉病基因(Apc)、K-ras、p53以及错

配修饰基因等[1]。目前仍有必要探讨这些基因突变如何影响正常结肠上皮细胞的

表型，含有基因突变的肿瘤前细胞如何发生恶性转化，以及阐明已知CRC中发生

变化的分子之间协同作用等。由于体外分化的人正常结肠上皮细胞的培养非常困难，

目前国内外研究仍多以结肠癌细胞作为相关研究模型[2-3]，显然这些肿瘤细胞并

不完全符合上述研究要求。结肠肿瘤前细胞即永生化结肠上皮细胞系(IMCE)，来

源于Immorto小鼠和Apcmin/+小鼠杂交后子代小鼠的结肠上皮细胞，其表型正

常，可发生恶性转化，已成为肠道肿瘤发生发展相关研究较为理想的细胞模型[4]。

本文主要就该细胞系的建立及其应用进展作一综述。

Immorto小鼠及Apcmin/+小鼠的建立为结肠肿瘤前细胞系的建立提供了可能。

Immorto小鼠携带了一种温度敏感的猴病毒40(SV40)大T抗原基因(tsA58)的突

变形式，使之可置于干扰素-γ(IFN-γ)诱导的H-2Kb启动子(H-2Kb-tsA58)控制下。

此外，研究表明80%以上散发性CRC存在Apc基因突变，家族性腺瘤性息肉病

(FAP)的发生则主要与Apc基因突变有关[5]。Apcmin/+小鼠是由C57BL/6J雄性

小鼠接受突变剂处理后与雌性小鼠AKR/J杂交，子代小鼠由于Apc基因两条链中

一条链的第850号密码子发生无义突变，编码亮氨酸的密码子(TTG)转变成终止密

码子(TAG)，形成截短APC蛋白，导致β-连环蛋白(β-catenin)不能降解，下游靶

基因激活，可自发形成肠道多发腺瘤性息肉，是研究肠道肿瘤发生发展的经典动物

模型[6-8]。

随着Immorto小鼠及Apcmin/+小鼠的建立，有学者在此基础上逐步建立了

IMCE细胞系[4,9]。由于IMCE细胞系来自于Immorto小鼠和Apcmin/+小鼠杂

交后子代小鼠结肠上皮，因此同时携带一个Apc突变基因和SV40大T抗原基因；

而用来源于年轻成年Immorto小鼠结肠上皮建立的细胞系被称之为YAMC细胞

系，它与IMCE细胞系最大的区别在于并不携带Apc突变，成为良好的实验对照

所需的正常细胞系。SV40大T抗原基因是与p53结合并抑制其在衰老方面作用

的一种永生化基因，在允许温度条件下(33℃)，SV40大T抗原基因产物以一种活

性形式与p53结合，促进细胞永生。而在非允许温度条件下(37℃～39℃)，基因

产物的形式发生改变，不能结合p53使细胞永生。有学者将YAMC、IMCE及结

肠癌细胞在分子遗传学、形态学及表型等方面进行了比较，见表1[9]。

YAMC细胞(Apc+/+)和IMCE细胞(Apcmin/+)作为一种正常结肠上皮细胞和肿

瘤前细胞模型已被用于多种细胞生物学功能的实验研究：(1)用于结肠上皮细胞增

殖和凋亡调控以及黏蛋白分泌的研究[10-13]；(2)研究诱导型一氧化氮合成酶

(iNOS)、环氧合酶-2(COX-2)及β-catenin等关键分子的调控[14]；(3)探讨各