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氯化锂调控人肺腺癌A549细胞增殖及侵袭转移的体外研究

林高阳;徐克

【摘要】目的:探讨氯化锂对人肺腺癌A549细胞增殖和侵袭转移能力的影响及其

调控机制.方法:应用MTT法、平板克隆形成实验评价细胞生长活力和增殖的生物

学特征变化;划痕实验、Transwell小室细胞体外侵袭实验检测肿瘤细胞迁移、侵袭

能力;Western-blotting法检测肿瘤细胞GSK-3β、P-GSK-3β和β-catenin的表

达水平变化.结果:MTT法显示细胞分化增殖能力随氯化锂浓度的增加受到明显抑制,

具有浓度依赖性变化.同时,随着检测时间的延长,在低浓度药物作用下(＜10

mmol/L)细胞出现增殖增强现象,可能存在药物时间耐受;平板克隆形成实验显示细

胞增殖受到不同浓度氯化锂的抑制,增殖能力的变化亦具有氯化锂浓度依赖性;划痕

实验、Transwell实验证实:氯化锂处理细胞后,细胞迁移、侵袭能力下降;Western-

blotting法显示:氯化锂处理肺腺癌A549细胞后,GSK-3β总蛋白表达下降、P-

GSK-3β表达增加,β-catenin总蛋白表达增多.结论:高浓度的氯化锂能够抑制肺腺

癌A549细胞的增殖和侵袭迁移,氯化锂抑制肺腺癌A549细胞增殖和侵袭迁移可

能是通过GSK-3β/β-catenin信号通路实现的.

【期刊名称】《天津医科大学学报》

【年(卷),期】2015(021)001

【总页数】6页(P9-13,21)

【关键词】肺腺癌;氯化锂;迁移侵袭;GSK-3β/β-catenin通路

【作者】林高阳;徐克

【作者单位】天津医科大学总医院肺部肿瘤外科,天津市肺癌研究所,天津市肺癌转

移与肿瘤微环境重点实验室,天津300052;天津医科大学总医院肺部肿瘤外科,天津

市肺癌研究所,天津市肺癌转移与肿瘤微环境重点实验室,天津300052

【正文语种】中文

【中图分类】R734.2

肺癌占全球恶性肿瘤发病率的12.7%，死亡率的18.2%，均高居首位[1]。肺癌分

为非小细胞肺癌和小细胞肺癌，非小细胞肺癌是最常见类型，目前约占全部肺癌患

者的80%，其中肺腺癌占50%，5年生存率约为15%。肺癌转移是肺癌的恶性标

志和特征，也是肺癌病人治疗失败和死亡的主要原因，约80%～90%的肺癌病人

死于转移[2]。目前尚无有效抑制肺癌转移的药物。锂是一种经美国FDA（Food

andDrugAdministration）批准首选用于治疗双相情感障碍性疾病的药物，并已

被安全用于临床数十年[3]。研究显示，精神障碍性病人中接受锂治疗的患者比未

接受锂治疗者患癌风险明显降低，患癌风险和锂剂量间表现出一个显著的反比关系

[4]，锂可抑制多种肿瘤细胞的增殖分化[5]，被认为是一种有效的抗癌剂，亦可作

为放化疗的辅助[6-7]。锂（Li+）对人体具有广泛的生物学活性，涉及胚胎发育、

免疫调节、细胞增殖和分化等。近来，其抗癌作用日益受到研究者的关注。GSK-

3β（Glycogensynthasekinase-3β）是锂作用的最常见的细胞内靶点之一[8]，

如通过锂抑制GSK-3β使前列腺癌和肝癌对TRAIL诱导的细胞凋亡更加敏感[9-

10]。最近研究发现Wnt/βcatenin信号通路的异常激活与多种人类恶性肿瘤的发

生、发展密切相关，然而氯化锂靶向抑制GSK-3β，调控肺腺癌A549细胞增殖及

侵袭迁移能力的研究尚罕见报道。本文就氯化锂作用肺腺癌A549细胞进行初步的

功能研究，以期发现调控肺癌增殖及侵袭迁移的信号通路，为氯化锂治疗肺癌增殖

及侵袭迁移奠定初步的研究基础及探究方向。

1.1细胞系和细胞培养人肺腺癌细胞系A549购自美国模式培养物保藏所

（AmericanTypeCultureCollection.ATCC，Manassas,VA,USA），A549细

胞从液氮中取出复苏后用含有10%胎牛血清（Gibco公司），1%丙酮酸钠，1%

谷氨酰胺，1%非必需氨基酸的RPMI-1640（Gibco公司）培养基在37℃、

5%CO2湿度的孵箱中孵育培养。

1.2细胞分化增殖能力测定取对数生长期的人肺腺癌A549细胞株，按1×104个/

孔细胞，培养液补足至200μL/孔，将细胞悬液接种至