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体外法研究pH与脂多糖或组胺的交互作用对奶山羊瘤胃上皮
细胞紧密连接蛋白mRNA表达量的影响
孙燕勇;高民;徐明;宋利文;李洋;李超;陈利青;胡红莲
【摘要】Theobjectiveofthisstudywastoinvestigatetheinteraction
effectsofpHandlipopolysaccharide(LPS)orhistamine(HIS)onmRNA
expressionlevelsoftightjunctionproteinsofrumenepitheliumofdairy
goatsinvitro.EighthealthySaanendairygoatswithsimilarbodyweight
andmilkyieldwereusedasthedonorsofrumenepithelium.A3×3two-
factorexperimentdesignwasadopted.Afterslaughtering,rumen
epitheliumwascollectedandinsertedinthemiddleofhalfchamberina
Ussingchamber.Bufferat5mLwasaddedtotheserosalside,and
differenttreatmentsofculturemediumsat5mLwereaddedtothe
mucosalside,eachtreat-menthad3replicates.Experiment1,factor1was
pH,andwas7.4,5.5,5.2,respectively;factor2wasLPSconcentration,andwas
0,30and60kEU/mL,respectively.Inexperiment2,factor1waspH,andwas
7.4,5.5,5.2,respectively;factor2wasHISconcentration,andwas0,0.5and
10.0ng/mL,respectively.Therumenepitheliumwascollectedafter
culturedfor80min,andtheexpressionlevelsofClaudin-1,Claudin-4,
Claudin-7,Occludingandzonulaoccludens-1(ZO-1)mRNAsweremeasured.
Theresultsshowedasfollows:1)theinteractionbetweenpHandLPShad
significanteffectsonexpressionlevelsofClaudin-1,Claudin-7andZO-1
mRNAs(P0.05).ComparedwithpH7.4×0kEU/mLLPSgroup,the
decreaseofpHorthesupple-mentationofLPSsignificantlydecreased
expressionlevelsofClaudin-1andClaudin-7mRNAs(P0.05),andtended
toriseexpressionlevelofZO-1mRNA,whileitwasthehighestinpH
5.2×60kEU/mLLPSgroup.2)TheinteractionbetweenpHandHIShad
significanteffectsonexpressionlevelsofClaudin-1,Claudin-7andZO-1
mRNAs(P0.05).pH5.5×0.5ng/mLHISgrouphadthelowestexpression
levelofClaudin-1mRNA,whichwasnotsignificantlydifferentfromthatin
pH5.2×0.5ng/mLHISgroup(P0.0
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