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微生物检验的基本操作技术--无菌操作.pdfVIP

微生物检验的基本操作技术--无菌操作.pdf

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长风破浪会有时,直挂云帆济沧海。——李白

微生物检验的基本操作技术--无菌操作

一、无菌操作技术

1、定义

是指在执行实验过程中,防止一切微生物侵入机体和

保持无菌物品及无菌区域不被污染的操作技术和管理方法;

无菌操作技术是微生物实验的基本技术,是保证微生

物实验准确和顺利完成的重要环节。

2、内容

无菌操作技术主要包括两方面:

1)创造无菌的培养环境。包括提供密闭的培养容器、培养

容器的灭菌、培养基的灭菌等;

2)在操作和培养过程中防止一切其它微生物的侵入的措施。

包括紫外线杀菌、甲醛熏蒸、超净台的消毒与检测、操作

工具、器皿灭菌、操作方法等。

3、无菌操作原则

1)在执行无菌操作时,必须明确物品的无菌区和非无菌区,

接种时必须穿工作服、戴工作帽应在进无菌室前用肥皂洗

手,然后用75%酒精棉球将手擦干净;

2)在操作前20~30分钟要先启动超净台和紫外灯,进行

接种所用的吸管、平皿及培养基等必须经消毒灭菌,打开

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长风破浪会有时,直挂云帆济沧海。——李白

包装未使用完的器皿,不能放置后再使用,金属用具应高

压灭菌或用95%酒精点燃烧灼3次后使用。严禁用手直接

拿无菌物品,如瓶塞等,而必须用消毒的钳、镊子等;

3)从包装中取出吸管时,吸管尖部不能触及外露部位,使

用吸管接种于试管或平皿时,吸管尖不能触及试管或平皿

边;

4)接种样品、转种细菌必须在酒精灯前操作,接种细菌或

样品时,吸管从包装中取出后及打开试管塞都要通过火焰

消毒;

5)接种环或接种针在接种细菌前应经火焰烧灼全部金属丝,

必须时还要烧到环和针与杆的连接处;

6)吸管吸取菌液或样品时,应用相应的橡皮头吸取,不得

直接用口吸。倾倒平板应在超净台内操作,并且在开启和

加盖瓶塞时需反复用酒精灯烧。

二、无菌操作的环境要求

1、无菌室

(1)无菌室的结构:更衣间、缓冲间、操作间;

(2)无菌室的消毒和防污染

•每日(使用前)紫外线照射(0.5~1小时);

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长风破浪会有时,直挂云帆济沧海。——李白

•每月用新洁尔灭擦拭地面和墙壁一次的方式进行

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