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操千曲尔后晓声，观千剑尔后识器。——刘勰
附件
医院人感染禽流感病毒核酸检测
标准操作程序
一、目的
确保人感染禽流感病毒核酸检测过程标准化、规范化，
降低人为不规范操作对检测结果造成的影响，保证结果的准
确性和可重复性。
二、适用范围
医疗机构临床基因扩增检验实验室按照《关于医院开展
人感染禽流感病毒核酸检测有关工作的通知》（卫办医政函
〔〕号）和《关于做好医疗机构人感染禽流感检测试剂供给
保障工作的通知》（卫发明电〔〕号）有关要求，使用国家
疾病预防控制中心制备或商品化试剂盒开展人感染禽流感
病毒核酸检测工作。
三、样本采集、运送和保存
尽量采集病例发病早期的呼吸道样本(上呼吸道样本包
括咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液和鼻洗液,下呼吸
道样本包括痰液、气管吸取物、肺洗液、肺组织等)。可将鼻、
咽拭子收集于同一采样管中，以便提高检出率。患者有下呼
吸道样本时，应优先采集。
根据试剂说明书对样本采集方法有关要求，制订样本采
操千曲尔后晓声，观千剑尔后识器。——刘勰
集标准操作程序（），并组织样本采集人员进行培训及考核。
样本的采集应当严格按照进行。
样本采集后，按照《人间传染病的病原微生物名录》中
高致病性禽流感病毒的相关规定进行包装，用密封容器立即
送往实验室。若气温高时，需放入冰块降温。样本抵达实验
室后，应尽快进行检测，小时内能检测的样本可置于～℃暂
时保存，小时内无法检测的样本则应置于≤-70℃状态保存。
如无-70℃保存条件时，可于-20℃冰箱暂存。样本避免反复
冻融。
样本采集、处理、运输及保存不当时，可因病毒降解出
现假阴性结果，也可因为样本“污染”出现假阳性结果。
四、检测
（一）样本处理
样本的核酸提取应当在样本处理区进行。按所采用的商
品化试剂盒说明书要求，取适量待检样本、阳性及阴性对照
进行核酸提取。样本应尽可能新鲜，提取过程应严防酶污染
及操作不当导致的降解。提取过程如涉及离心步骤，应采用
低温冷冻离心机；在生物安全柜内进行加样、提取过程中，
为防止降解，可将试管架置于托盘内平铺的碎冰上。提取好
的应及时用于检测，否则应当-70℃保存。如无-70℃保存条
件，可于-20℃冰箱暂存。
（二）试剂准备
试剂准备应当在试剂准备区进行。根据所用的试剂盒，
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样本可进行甲型流感病毒核酸、禽流感亚型或病毒核酸的检
测。试剂的配制按所用商品化试剂盒说明书进行。除酶混合
物外，其它试剂在使用前应当在室温充分复融，混匀并瞬时
低速离心。反应液分装时尽量避免产生气泡，上机前注意检
查各反应管是否盖紧，以免管内溶液泄露污染仪器。分装有
扩增反应液的反应管应当扣盖或装入密实袋内再转移至样
本处理区。
（三）加样
加样应当在样本处理区进行。加样时应当使样品完全落
入反应液中，不应有样品粘附于管壁上，加样后应尽快盖紧
管盖。
按试剂、仪器说明书完成加样和反应管准备。
（
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