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猪链球菌自家灭活苗的制备及防治

猪链球菌病主要是由Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｌ群链球菌引起的猪的一种传染病，根据感染链

球菌类群的不同，病猪临床症状主要表现为共济失调、圆圈运动等脑神经炎症状及前后

肢关节肿大、跛行；解剖病变主要表现为支气管肺炎、脑膜脑炎、败血症、关节炎、心

内膜炎、淋巴结炎、化脓性皮肤脓肿等。在近２０年来，随着规模化养猪的不断发展，

猪链球菌病曾在养猪业中普遍流行，给养猪业带来了严重的损失。本文根据作者到湖南

某猪场进行种猪售后跟踪服务时遇到的该场的产房及保育舍仔猪链球菌病发生率高的

情况，从发病仔猪中分离纯化出致病性链球菌，经灭活制成自家灭活苗在该场使用，结

果该猪场猪链球菌病的发病率与死亡率均有明显的下降，现将有关疫苗制备及试用情况

介绍如下。疫苗制备１、症状及病料的采集产房仔猪或保育仔猪发病急，眼结膜潮红、

流泪，出现不同程度的神经症状或前后肢关节肿大，关节患部柔软，触之有疼痛感，内

含黄色胶样液体或白色脓样物。挑选有典型神经症状及有关节炎症状的产房仔猪及保育

仔猪，且要求在发病初期，没有使用任何抗生素治疗过，体温升高在４１℃以上的病猪

多头。剖检发现病猪的脑膜、肺、肝、淋巴结有不同程度的出血点，心包、腹腔有纤维

素性渗出物。关节腔内充满黄色胶样液体，有的形成干酪样物附着在关节面。无菌采取

病猪的脑、肺、肝、关节等病变部位的组织或关节液，进行细菌的分离和鉴定。２、细

菌的分离与鉴定将采集的病料分别接种到血液琼脂平板培养基上，３７℃培养１２—

２４小时。结果可见有针头或针尖大小的灰白色、湿润、粘稠、周围隆起的半透明菌落，

有的菌株在马血液琼脂平板上有β—溶血，有的菌株在绵羊血液琼脂平板上菌落周围有

α—溶血。菌落直径约０·５—１·０毫米，延长培养时间菌落很少增大或不增大。革

兰氏染色镜检：可见单个或成对排列的圆形或椭圆形革兰氏阳性小球菌，有些菌株趋于

杆状。在培养基上很少形成链状，而在肉汤中可形成长链状。挑取上述菌落分别划线培

养于加入０·１％ＣＡＮ（其作用是抑制除链球菌以外的其他细菌的生长）的琼脂及

“脑心汤”试管培养液分离提纯培养。经镜检从脑、肺、肝、关节液分离的菌落中挑选

出链球菌，然后进行细菌的鉴定。生化反应：对上述分离到的革兰氏阳性球菌进一步做

生化反应进行鉴定，能发酵葡萄糖、蔗糖、乳糖、麦芽糖、水杨苷、海藻糖和菊糖，产

酸不产气；过氧化氢触酶反应阴性。动物接种：将经分离鉴定挑选出的４份（脑、肺、

肝、关节液）链球菌培养液分别给４只家兔腹腔注射，２毫升／只。接种后１２—３６

小时内家兔全部死亡，且从死亡家兔的心、肝、脾等器官能分离到单纯的链球菌，故可

确定该病猪的脑神经炎及关节炎主要由链球菌感染所致。３、增菌培养和灭活将分离

的４份纯化的链球菌在无菌条件下每份分别接种１０支试管培养液增菌培养６—１２

小时，然后把每支试管培养物接种到１瓶５００毫升的“脑心汤”培养液中，３７℃增

菌培养１８—２４小时。灭活：用０·３％体积（５００毫升培养液中加入１·５毫升，

下同）的福尔马林灭活，福尔马林要逐滴加入，并且要一边加入一边振荡，然后放入培

养箱中３７℃恒温培养６小时。为保证灭活效果，期间需要每２小时均匀振荡一次，有

条件的最好用振荡培养箱３７℃恒温培养，制成灭活菌苗。４、安全检验取灭活的培

养物在血液琼脂中划线３７℃恒温培养２４小时，观察有无菌落生长。经检验无菌生长

后，进行混匀及分装。混合前，分别将每一瓶培养物涂片镜检，看有无其它污染菌，若

有，则废弃。在无菌操作环境下，把脑、肺、肝、关节液的培养物按１∶１∶１∶１的

比例混匀于大容器内，然后加入０·３％体积的浓度为１０％的硫代硫酸钠中和培养物

中的福尔马林，这样可以减少残留福尔马林对猪只的刺激性，同时减少因福尔马林的长

时间存在导致细菌的保护性抗原的降解或者抗原性丢失。同时，为了预防或杀灭污染菌，

可在１０００毫升混和物中加庆大霉素１００毫克，加入０·０１％体积的硫柳贡防

腐，后按需要分装封存，于４℃冰箱中可保存３年有效。疫苗制好后，选５头仔猪，每

头猪分别注射５毫升自家苗，若３０分钟内出现如呕吐等异常症状者该批疫苗不能使

用。使用效果１、试验材料和方法从１９９９年３月开始，在该场中试用自家灭活苗，

共选取６０头妊娠母猪，分别在１９９９年３月选３０头，２０００年３月选３０头；

每批都随机分成２组，每组１５头，分别设为试验组和商品苗对照组。试验组母猪在产

前５周及３周各用上述自