Agilent_液相色谱仪操作规程 .pdf

Agilent液相色谱仪操作规程

★样品与流动相要求：

1.样品临用前用0.45um滤膜过滤（区别水相膜与有机相膜），或者临用前离心取上清液（转

速1万，20分钟)

2.缓冲溶液必须当天配制，每次使用前用0.45um的水相膜过滤，水要求使用当天的超纯水，

甲醇或乙腈等有机溶剂要求使用色谱纯。流动相临用前超声脱气20分钟

★液相开机操作过程：

1．首先要启动电脑，进入Windows后,电脑在后台自动运行AgilentbootpService。

2．从上往下打开液相色谱仪各模块前左下方的电源开关，液相各模块进入自检，右上角的

指示灯不同颜色闪烁几下，最后变成橘黄色(或灭掉ALS、RID)，启动完成。

3.双击电脑桌面的Instrument1联机图标，进入LC化学工作站（方法与运行控制界面）。

4.调用或者编辑相应的操作方法。

★液相关机操作过程：

1.根据具体情况，使用水或溶剂，泵流量设为1.0ml/min,把系统的管道及柱子清洗干净。

2.根据具体情况，不定时把A、B、C、D通道用有机溶剂冲洗干净，防止生长藻类等。

3.把系统关闭(即把泵停下来及检测器的灯灭掉等)，若有sealwash,把其清洗的水卡住。

4.先退出LC化学工作站，从下往上关掉液相色谱仪各模块前左下方的电源开关。

5.退出电脑Windows系统，关掉电脑电源。

★液相的数据采集操作过程：

1．从化学工作站菜单的方法中编辑完整方法，或者调用方法,一般是方法存在如

D:\CHEM32\1\METHODS\___.M，即运行此方法。

2．从化学工作站菜单的仪器的启动系统,可点击桌面上的启动按纽，也可以点每一模块图

标中的控制来开或关。(若有手动SealWash应先把打开，约每分钟20滴)

3.手动进样或自动进样器单针进样时：从运行控制中的样品信息输入样品信息

4.待工作站提示就绪(变绿色)、仪器基线平衡稳定后:

手动进样:若是VWD或DAD先按一下平衡,把基线调零，阀在Load的状态，

用注射针取样品从手动进样阀口注入，把手动阀转向Inject的方向，开始做样采集数据。

★注意事项：

1．C18反相柱一般适用于缓冲溶液PH值在2.2~7.8范围，超出范围柱子会损坏

2．柱温箱设置可低于室温10℃，最高80℃

3．四元泵的比例阀有A、B、C、D四个通道，建议将盐溶液接在下面的通道（A或D），将有

机溶剂接在上面的通道（B或C）上，进样量应是定量环体积的4倍（定量环20ｕＬ，进样

量80ｕＬ）

4．检测结束后，C18反相柱用甲醇（脱气）冲洗柱子30分钟，若流动相是缓冲溶液时，

还需先用纯水（脱气）冲洗系统60分钟，再用甲醇冲洗柱子30分钟，先用纯水再用甲醇清

洗进样口

5．仪器由专人管理，需要在本仪器进行项目研究而使用仪器者，必须进行操作培训和考核，

并获负责人批准，方可上机进行操作

6．上机者必须进行预约登记，一般情况下，需要提前一周预约用机时间

7．仪器使用者需了解仪器的配置和安全事项。空气湿度应低于70%，室温20℃，仪器需

防震动、防灰尘，使用过程如遇到异常情况，需及时向负责人报告，并做好记录

12．关机后立即清理实验台及地面，并对仪器使用情况、仪器状态如实进行登记

补充说明：

1、建立新的文件目录

首先在我的电脑D盘建立一个新的文件夹，个人建立的方法数据可以全部保存于该文件

夹中，打开化学工作站，点击“方法和运行控制”模块，点击菜单中“视图”选项中“首

选项”，添加所建立的文件夹确定。

2、数据保存

点击“数据分析”模块，点击菜单栏中“文件”选择“调用信号”，选择需要打开的数

据[**.D]，在图谱上方点击打印图标形成PDF格式，再保存到指定文件夹中。若只需保

存色谱图，则打开图谱后点击菜单栏“图形”选项中的“复制到剪贴版”，粘贴到word

文档即可。

3、若色谱方法为梯度洗脱，则需设置后运行时间。

4、开机运行方法前，需进行泵和管道的冲洗，将冲洗阀逆时针旋松，设置流量5ml/min，

冲洗15min，保证管道内无气泡。注意一定要将冲洗阀旋松，否则高流速会冲坏柱子。

5、设置检测波长参比值，根据样品中没有吸收值的某个波长值设定。

6、若使用联机软件时，需保证脱机软件关闭。