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猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒分子生物学研究进展
摘要:猪繁殖与呼吸综合征是目前养猪业中一种严重的病毒性传染病,引起猪严重繁殖障
碍和呼吸道疾病。该病的病原体属于动脉炎病毒属,是一种不分节段的单股正链RNA病毒,
含有8个开放阅读框(ORFs),ORF1编码非结构蛋白,ORF2~ORF7编码结构蛋白。其中ORF7
编码的核衣壳(N)蛋白和ORF6编码的非糖基化基质(M)蛋白为优势结构蛋白。猪繁殖
与呼吸障碍综合征毒基因组存在广泛的遗传变异性,M蛋白和N蛋白在所有的毒株之间相
对比较保守,可作为血清学诊断的靶抗原。文章就猪繁殖与呼吸障碍综合征毒在分子生物学
方面的研究情况作一综述。
关键词:猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒;基因组;遗传变异;分子生物学
猪繁殖与呼吸综合征(Porcinereproductiveandrespiratorysyndrome,PRRS)是由猪繁殖与
呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种传染病,以引起母猪繁殖障碍、仔猪和育成猪呼吸道
症状及高死亡率为主要特征1。该病于1987年首次在北美发现2,之后在世界范围内迅
速传播,给养猪业造成了极大的经济损失。郭保清等(1996)3首次在国内疑似PRRSV感
染的猪群中分离出PRRSV,从而证明了该病毒在我国的存在。目前,PRRSV也已成为我国重
要猪传染病病原之一。
1分类、形态及理化特性
PRRSV属于第10次国际病毒大会上新设立的动脉炎病毒科动脉炎病毒属4,其同属成员还
有LDV、EAV和SHFV。PRRSV系不分节段的单股正链RNA病毒,电镜观察纯化的病毒粒子
呈球形,直径约为45nm~83nm,内有一个呈20面立体对称的具有电子致密性的核衣壳,
其直径为25nm~35nm,表面上有约5nm的突起,外绕一层脂质双层膜。
PRRSV对氯仿、乙醚等脂溶剂和去垢剂敏感。在氯化铯和蔗糖密度梯度中浮密度分别为1.13
g/cm3~1.19g/cm和1.18g/cm3~1.23g/cm3;RRSV热稳定性差,低温下有较好稳定性,
-70℃下可长期保存,56℃经45min完全失去致病性,干燥条件下也可使病毒迅速失去感
染性;PRRSV对pH敏感,在6.5pH7.5的环境中稳定,不耐酸碱,pH7或pH5可使病
毒感染力迅速丧失。自然分离到的PRRSV不凝集猪、羊、鸭、鸡、小鼠、豚鼠及人的O型
红细胞,但经非离子去垢剂和脂溶剂处理后,可凝集小鼠的红细胞。
2病毒的基因组结构和表达
PRRSV的核酸系不分节段、单股、正链RNA,大小约为15kb,含8个开放阅读框(ORFs),
其3′端有一个Poly(A)序列,PRRSV基因组顺序为5′-ORF1a和ORF1b-ORF(2-6)ORF7-3′端。
ORF1(包含重叠的16个核苷酸的ORF1a和ORF1b)长约12kb,占整个基因组的80%,位
于基因组5′端211个碱基的非编码前导序列之后,编码病毒RNA复制酶和聚合酶,其氨基
酸序列含有EAV和LDV的保守成分5;ORF1a编码区有一些疏水区,一个推定的丝氨酸蛋
白酶区和富含半胱氨酸区;ORF1b含聚合酶元序列、蜗牛酶元序列、富含半胱氨酸和组氨酸
的锌指区及功能不明的保守区4个特定区域6。在ORF1a和ORF1b的重叠区可识别出7核
苷酸结构(UUUAAAC)和形成RNA拟节序列,这两种结构为RNA聚合酶翻译过程中核糖体
移码所必需。ORF2~7分布在约3.5kb的3′端。ORF7的终止密码子之后为114个碱基的
非编码区和仅20个碱基的Poly(A)尾序列,相邻的ORF框之间发生部分重叠。ORF2~5编码
病毒4种囊膜相关蛋白GP2-5,ORF6编码非糖基化蛋白;ORF7编码核衣壳(N)蛋白。3′端
非编码序列可能是复制过程中负链RNA开始合成时聚合酶结合的区域。
PRRSV的基因表达模式与冠状病毒和凸隆病毒类似,其转录机制为先导引物机制,通过产
生6个亚基因组mRNA进行基因表达。转录中先导序列连接到每个mRNA中,产生具有相
同的5′端先导序列的亚基因组mRNA,其长度超过200个碱基,且3′端也有相同的共同
序列(CCGG/AAATT)Poly(A)的嵌套式结构。另有研究报道认为病毒是通过产生7个亚基因
组mRNA来表达的,其额外的亚基因组
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