2023高职41 检验检疫技术 技能赛题(模块3 生物化学和免疫学检验试卷)(赛项赛题).pdfVIP

以铜为镜，可以正衣冠；以古为镜，可以知兴替；以人为镜，可以明得失。——《旧唐书·魏征列传》

全国职业院校检验检疫技术竞赛

生物化学和免疫学检验-血清总蛋白测定+乙肝病毒表面抗体检测试卷（高职组、本科

组）

一、竞赛说明

1.主要考核医学检验技术专业、卫生检验与检疫技术专业学生对生化检验和免

疫学检验基本操作技术的熟练程度和对半自动生化分析仪、酶标仪等常规设备的

规范操作能力。

2.本题满分100分，完成时间55分钟。

3.独立完成，不得相互询问或讨论。

4.考核成绩为操作过程评分、操作结果和考核时间评分、职业素养之和。

5.全部操作过程时间和操作后处理时间计入时间限额，超过规定时间将终止操

作。

6.设定项目：血清总蛋白（TP）测定（双缩脲法）+乙肝病毒表面抗体检测项

目（双抗原夹心酶联免疫吸附法）。

二、实验原理

1.血清总蛋白测定原理：血清蛋白质分子中的肽键(-CO-NH-)在碱性溶液中能

与试剂中的Cu2+作用生成稳定的紫红色的络合物，此络合物在540nm处有明显

的吸收峰，其溶液吸光度在一定浓度范围内与血清（浆）蛋白质（TP）含量成正

比，经与同样处理的蛋白标准液比较，即可求得血清（浆）TP含量。

2.乙肝表面抗体测定原理（双抗原夹心酶联免疫吸附法）：在微孔板条上预包

被HBsAg，加入待测样本及酶标抗原（HBsAg-HRP）试剂进行孵育；样本中的HBsAb

与包被抗原和酶标抗原形成“包被抗原-抗体-酶标抗原”复合物；洗板后加入酶

底物显色溶液，复合物上连接的HRP催化色原底物发生显色反应。若样品中无

HBsAb时，不发生显色反应。

三、实验器材和试剂

1.血清总蛋白测定：小号试管4只（使用3只，备用1只），试管架，移液枪

1支（规格5～50）及配套枪头、枪头盒，1ml、2ml刻度吸管各1支，洗耳球

μl

以铜为镜，可以正衣冠；以古为镜，可以知兴替；以人为镜，可以明得失。——《旧唐书·魏征列传》

1个，计时器1个，托盘1个。半自动生化分析仪、恒温水浴箱、锐器盒、废液

缸、污物缸、垃圾回收桶、胶水、签字笔、记号笔等。

2.乙肝病毒表面抗体检测：微孔板（已用纯化HBsAg包被，96孔），洗耳球1

个、试管架1个，手动可调式移液器（已校正）1把及配套枪头、枪头盒、滤纸、

冲洗瓶（内装已经稀释的洗涤液）、标记笔、计算器、签字笔、计时器、恒温水

浴箱、计时器（孵育专用）、酶标仪、消毒洗手液、面盆、抹布、废液缸、锐器

盒，滤纸，移液枪架、振荡器、废液中转箱，医疗废物桶（反应板/杯）

3.实验试剂：双缩脲法总蛋白测定试剂盒、乙肝病毒表面抗体检测试剂盒（含

酶标记、酶底物显色溶液、阴性对照、阳性对照）

四、实验标本

血清总蛋白测定建议购买质控血清作为标本。乙肝病毒表面抗体检测使用不同

浓度无溶血血清标本。

五、操作步骤

1.血清总蛋白测定

取3支洁净的小试管，按表1操作如下：

TP的操作

加入物空白管(B)标准管(S)测定管(U)

生理盐水（μl）2500

蛋白标准液（μl）0